[发明专利]一种以基因优化方法获得的抗草甘膦基因及其表达载体无效
| 申请号： | 200510067122.3 | 申请日： | 2001-05-24 |
| 公开（公告）号： | CN1680556A | 公开（公告）日： | 2005-10-12 |
| 发明（设计）人： | 徐培林;何鸣;杨中艺 | 申请（专利权）人： | 中山大学 |
| 主分类号： | C12N15/52 | 分类号： | C12N15/52;C12N15/31;C12N15/63;C12N15/70;C12N1/21 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 510275广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明利用DNA序列同源重组的特性和传统PCR扩增法的热循环反应，设计出以两个或两个以上同源性大于50％的基因序列为源模板，并采用两步PCR扩增反应的简便高效的基因优化方法。并以此方法获得了两个发生多点突变的，具有较强草甘膦抗性的EPSP合成酶基因。其编码的酶具有比野生型低得多的K[PEP]，而K[草甘膦]却明显增加。既提高了酶的催化效率，又减低了酶与草甘膦的亲和力，使该酶抵御草甘膦的能力大幅度提高。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 基因 优化 方法 获得 抗草甘膦 及其 表达 载体 | ||
【主权项】：
1.一种aroAM13的DNA序列，其特征是其所编码的具有草甘膦抗性的EPSP合成酶与大肠杆菌aroA基因所编码的氨基酸序列相比，含有下列氨基酸置换：苏氨酸23→丝氨酸和精氨酸330→苏氨酸。
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