[发明专利]一种微生物乳糖酶的固定化方法及其应用

摘要

本发明涉及一种乳糖酶的固定化方法及固定化乳糖酶的应用。该发明利用发明人筛选得到的树脂作为载体吸附固定用重组毕赤酵母发酵得到过滤清液中的胞外游离乳糖酶；再将这种吸附了酶的载体用海藻酸钙包埋方法与戊二醛交联方法处理，制备成高结合强度的固定化乳糖酶。以该方法制备的固定化乳糖酶作为生物催化剂水解5％乳糖溶液，固定化酶用量为10～100％(w/v)，5～60℃下作用0.5～1小时，连续转化52批，乳糖水解率保持在75％以上；以该方法制备的固定化乳糖酶处理新鲜牛奶，5～60℃下转化0.2～8小时，连续转化30批，乳糖水解率保持在70％以上。

主权项

1.一种固定游离乳糖酶的方法，包括以下步骤：(1)按现有技术方法制备游离乳糖酶；(2)将游离乳糖酶吸附于孔径范围为80～200的大孔树脂上；(3)将吸附了酶的大孔树脂用海藻酸钠溶液浸泡，搅拌，滤出，再用包埋试剂进行包埋处理；(4)将步骤(3)中经过包埋处理的大孔树脂用交联试剂，在4～20℃下交联1～4小时，滤出，即得固定化酶。