[发明专利]一种内切β－1,3葡聚糖酶基因及其克隆方法

摘要

一种内切β－1，3葡聚糖酶基因及其克隆方法，属于微生物基因工程领域。本发明提供了来源于粗糙脉孢菌(Neurospora crassa)AS 3.1604的一种内切β－1，3葡聚糖酶基因glu，提供了基因glu的核苷酸序列和相应蛋白质的氨基酸序列，提供了含有基因glu的大肠杆菌表达载体pET28a－glu以及在大肠杆菌中的高效表达。本发明可用于内切β－1，3葡聚糖酶工业化生产的基因工程菌的构建，提高微生物发酵法生产内切β－1，3葡聚糖酶的水平和质量。

主权项

1、一种来源于粗糙脉孢菌(Neurospora crassa)AS 3.1604中的内切β-1，3葡聚糖酶基因glu，其核苷酸序列为：atgtctccat tgctggacgt ctccgcttca gtctccttga actggaccag cgctcaaggt 60gtttccgacc gaccgaccag gttttggtac tccagtatcg accacagcac tccccttgtg 120cgcggcttcg ctcccgacct tgacggagat gtcaactatg ccgtcttcaa ggcagtgaaa 180cccggcgatg gggcgagtat ccaaacagcg atcaactcgg ggaccaacgg tgctaagaga 240cacggtctat ggtttgcttc ccagccacga gttgtgtaca taccgccggg aacatacgag 300atctctgaga ccatcttcat gaacactgac acagttctga tgggcgacgc aacagatgta 360aggacgatgg cctctcccat gcaagcggaa ccacccatca tcaaagcatc ttcgaacttc 420tccgggaatc aaacgttgat ctctggccaa gaccccgcaa ctggtatttc cggtgagcta 480tcgttcgccg tctccttgaa gaacttaatc ctcgacacca ccaatatccc aggagaccaa 540gccttcacag ctctctggtg gggtgttgct caaggagctc agttgcagaa tgtgaagatc 600cgtatggcgc ctgccatcga tggtgaggga cacagtggta ttcgcctcgg ccgtggctcg 660actctcggag tttcggatgt tcgtatcgaa tacgggcaaa acggtatctg gtataacggc 720catcagcaag cagttttcaa gagcatctac ttcttcaaaa atgctgtggg aatgttcatt 780gacggtggcg ccacgatcag catcgtcaac ccgacctttg acggctgtgg cttgggcgtc 840taccacgtcg cgggcaaccc ttggattggt ctaatcgatg ccatctctat caactccggt 900acgacgctga agacgacaga ctggccaaac tacctggtcg agaaccttcg tgtcatcagc 960ggaaaaaccg agaacgcggt cgaagggccc ggcgactttg ttctggcaac caagccaaac 1020gtagcccagc tctcgtacgc caacactgtt ggccatgatc ccatctatgg ccccattgaa 1080gcagcgcagt tgaaccgtcc atcatcgctg gcgcctggac ctgatgggcg ttatgcatac 1140cttccagcac cgaactatgc cgagctcagc gtccaagact ttctcaacgt caaagatcct 1200cttcagaacg gaggctgcct cgtctttggc gacaacaccc gagacgagtc ctccaccctc 1260aacgccatcc ttcgtctggc cgctcgtcag aacaagatcg cttactttcc cttcggcaag 1320taccgcgtcg actcgactct tttcgttccc tccggctccc gtattgtcgg cgaagcgtgg 1380gccacaatca cgggatatgg ccccttcttc acagacagcg ctcatcccca accgatcatc 1440aaggtcggca accccggcga tattggcacc gcgcacatcc aggatatgcg cttcaccgta 1500tcggacgtgc ttcccggagc catcatcctg cagttcaacc tcgccggtgc gcagccgggg 1560gacgtggcaa tctggaactc gcttgtcaca gtcggaggaa cgcggggtgc gaaggcgtta 1620acggacaagt gcgtcaatcc ggagacggac gaggcgtgca aggctgcttt cttgggtatc 1680catctcgctt cgacgtcgtc cgtgtatctc gagaacgtat ggaactgggt agccgaccac 1740atcgccgaag aaccgatatc gccgggcggg agcaacatcg ccggaaaggg cggagtgctc 1800gtcgaagcga ccaaggggac ctggctgcac gcgctgggat cggagcactg gtggctgtac 1860cagcttaatc tgcgaaaggc gtcgaatgtg ttagtgacga tgttgcaaag cgagaccaac 1920tatgaccagg gagacaacgc ggtgcaggtg gtgccgcatc cgtggacgcc ggacgtggag 1980ggatggggcg atccggactt tggctggtgc gcggggcagg cgaacgagaa gaggtgtcga 2040atggggttcg cgaactacat caatggcgga agcaacattc ggacctacgc cagtgcctcg 2100tgggcgttct tcagcgggcc gggataccaa gggtgcgcgg ggcagtatca gtgccaacgg 2160tatatgcatt gggtggagga gacaccggcc aatttgcagg cgtttgggtt gtgctcgaag 2220gatacgtggg cgacgttgag gttggagaat ggaaccgaga ttgtcacgaa cgaggggttc 2280accgggtcgt ggtctgggtc gggaggcgat gtcggcaggt acactccgga ggcatcgtga 2340其中，atg为起始密码子，tga为终止密码子。