[发明专利]草地早熟禾高频基因枪转化体系建立方法无效
申请号: | 200510085474.1 | 申请日: | 2005-07-21 |
公开(公告)号: | CN1715418A | 公开(公告)日: | 2006-01-04 |
发明(设计)人: | 韩列保;信金娜;刘君;曾会明;李雪;何宇锋 | 申请(专利权)人: | 北京林业大学;韩烈保;信金娜 |
主分类号: | C12N15/87 | 分类号: | C12N15/87;C12N15/89;C12N15/82 |
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地址: | 100083*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明采用基因枪转化法对草地早熟禾胚性愈伤组织进行轰击,建立了一套完整、高效的遗传转化体系。适合于草地早熟禾的基因枪转化参数为:Ca(NO3)2+PEG4000包被质粒DNA;使用1μm金粉作为质粒DNA的载体;处理1(打枪高度6cm、轰击1次、无渗透处理)与处理5(打枪高度6cm、轰击2次、有渗透处理)进行轰击,转化效果最好。适合于转化愈伤筛选的抗生素浓度为100mg/L。运用此转化体系,成功将三种与干旱、盐胁迫有关的功能基因转入草地早熟禾愈伤组织中,获得了转基因植株。转化频率高达3.92%。 | ||
搜索关键词: | 草地 早熟 高频 基因 转化 体系 建立 方法 | ||
【主权项】:
1.草地早熟禾高频基因枪转化体系建立方法,其特征在于:1)适合于草地早熟禾成熟种子诱导出的胚性愈伤组织为转化受体;2)选择DREB1A、CMO、BADH-CMO共3种与干早、盐胁迫有关的基因对草地早熟禾进行遗传转化。3)对基因枪转化的具体因素进行了筛选与优化;4)对使用抗生素(潮霉素)的浓度进行了筛选,找到合适的临界值。
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