[发明专利]免疫球蛋白结合结构域与荧光蛋白融合蛋白质及其应用

摘要

本发明属于生物工程技术领域。本发明提供了一种由免疫球蛋白结合结构域与荧光蛋白构成的融合蛋白质，及其基因工程表达和分离纯化方法。利用本发明表达和纯化的免疫球蛋白结合结构域与荧光蛋白构成的融合蛋白质可以用来在生物学、医学等领域进行诸如酶联免疫吸附分析、WesternBlotting分析、斑点杂交检测、免疫组化分析、流式细胞检测等各种免疫检测和分析。本发明还提供了免疫球蛋白结合结构域－绿色荧光蛋白(ZZ－EGF)、免疫球蛋白结合结构域－红色荧光蛋白(ZZ－DsRed)两种融合荧光蛋白的实例。

主权项

1.一种由免疫球蛋白结合结构域与荧光蛋白构成的融合蛋白质，其特征是在该类融合蛋白质分子中，具有免疫球蛋白结合能力的结构域和能够产生荧光的荧光蛋白融合，其N端或C端还可以分别融合具有帮助蛋白质纯化作用的融合蛋白或短肽标签、或者N端和C端同时融合有具有帮助蛋白质纯化作用的融合蛋白或短肽标签，其结构组成为：a.ZZ-荧光蛋白b.荧光蛋白-ZZc.A-ZZ-荧光蛋白d.A-ZZ-荧光蛋白-ZZe.ZZ-荧光蛋白-Bf.荧光蛋白-ZZ-Bg.A-ZZ-荧光蛋白-Bh.A-荧光蛋白-ZZ-B其中A肽、B肽分别为目前常用的融合蛋白或短肽标签，如大肠杆菌硫氧还蛋白、谷胱甘肽-S-转移酶、大肠杆菌麦芽糖结合蛋白、组氨酸短肽标签、Flag标签；荧光蛋白是指能够产生荧光的蛋白质，如绿色荧光蛋白、红色荧光蛋白。