[发明专利]棉花GhZFP1基因序列及其克隆与应用

摘要

本发明涉及棉花中CCCH型锌指结构的GhZFP1基因的克隆、重组及耐盐性功能分析，属于分子生物学和生物技术领域。从0.3mol· L^－1NaCl处理的棉花叶片中提取总RNA，分离出mRNA，构建棉花盐胁迫下的cDNA文库，进行差异筛选，从中分离出编码CCCH型锌指结构的GhZFP1蛋白的基因。进一步构建正义表达载体，转化烟草和水稻，转基因植株具有较高的耐盐性，获得的转基因烟草能在200mmol·L^－1的盐浓度下正常生长，转基因水稻能在100mM的盐浓度正常生长。因此，该基因是一个重要的抗盐基因，可以用于转化盐敏感植物来提高其耐盐能力，对于盐敏感植物在盐碱地上的推广种植，具有非常重要的经济效益和社会效益。

主权项

1.一个克隆的棉花GhZFP1基因，其特征在于它具有下述所示的核甘酸序列： 1 acggccgggg gtccccttat cactcagcac tttattcttc tctctccatt aatcttcatt 61 gaaagaaaat catctttgct ttcacccatg accactgttt atgacccttc acaccatctc 121 acctccaaaa aattgtgttt caaggacctt gaaatccctc caaggaaaaa gcaactccat 181 tgttgccaca acgccgccgc catggaactt ccccaccacg aagctaggct ccacaaatac 241 cttccttcca atgaagacga tgacggcacc gatgatccat acggcaccga ccatttccgc 301 atgtacgagt tcaaggtaag aaggtgtaca aggagccgta gccatgactg gactgactgt 361 ccttttgctc atccaggtga aaaagcccga cgtcgtgacc ctactcggta ccaatactcc 421 tccaccatct gttctgactt ccgccgtggc ggtggttgcc ctcgcggcga tgactgtgag 481 ttcgctcatg gagtgtttga gtgttggcta caccctacac gttacagaac cgaagcttgt 541 aaagatggta agaattgcaa gcgtaaggtt tgcttctttg ctcattcgtc acgtgagctt 601 cgtctcttgc cggaatcaca acctccatac aaaaactctg acaagaacta taaccattgc 661 tgcttgtttt gccggtccgt tacatcgtcg tcgtcgttgt ccccaacaag cactctcttg 721 ggtttatctc atttctcgag atccccatcc ctgtcaccgc ctctatctcc cttaaaacac 781 cagcaaagaa caccaaggta cggcggtgat cgtattagta aatttggaac cgaaatgaca 841 agcagttacg atgatgtttt gttgaaggaa gtcatgagtt atttaggaac catgaatttg 901 tccgaagtat cttcaccaat ggctactact gcaaatacaa acattccatg gttcgatgtt 961 tcattcaaag gagctccttc aacggtaagt ccttctggtt ctggtgaata tttcaatggt1021 ggtggtgatg atgagaaaaa caatggaaac ggtgtcgttt tggatcatga tcttgacctc1081 gggtgggtta atgagctctt gatgtagagg aagaagatat atatatatat gatctgcaaa1141 gtgtgtatat tttatgtgtg attgggttta aaaagattgc tgatctgatg attgttttaa1201 atatttcata ttggcaaacc aagttaattt caatttgtag gctttttttt cttgagagat1261 ctaatatgat cttcttttta tttatgtact tttgactatg aatatgatga agtcaacctt1321 ctgttcgaga aaaataaaga aaactggtcg ggccgcctcc gccctctaaa tctctaa 。