[发明专利]一种同时检测A、B、C三组人轮状病毒的玻璃基因芯片及制备方法与应用

摘要

本发明公开了一种同时检测A、B、C三组人轮状病毒的玻璃基因芯片，包括经醛基化处理的玻璃片和阵列式分布于玻璃基片上的寡核苷酸探针、对照和空白的点涂层，所述点涂层是6条不同组别的人轮状病毒组特异性检测探针，1条阳性对照探针，4条阴性对照探针以及空白点样液对照，并且所述检测探针与对照探针以poly(dT)15作为连接臂，并在探针5′端加入带氨基的六碳基团。本发明还公开了所述芯片的制备方法与该芯片在制备临床诊断试剂中的应用。本发明的芯片采用多重PCR扩增方式，可同时用于对多组人轮状病毒的基因检测和组别鉴定，具有广阔的应用前景，有望满足食品卫生监测，疾病预防控制和临床医疗领域对人轮状病毒检测的需要。

主权项

1.一种同时检测A、B、C三组人轮状病毒的玻璃基因芯片，包括玻璃基片和阵列式分布的寡核苷酸探针与对照及空白的点涂层，其特征在于，所述的玻璃基片是经醛基化处理的玻璃片；所述的寡核苷酸探针与对照及空白的点涂层分布于玻璃基片上，包括6条不同组别的人轮状病毒组特异性检测探针，1条阳性对照探针，4条阴性对照探针以及空白点样液对照，其中，所述的6条人轮状病毒组特异性检测探针的基因序列是：ProbeA1：5′-ATTTATTGAATGCTTCGATAT-3′ProbeA2：5′-ACTGGTGAGTGGATTGTTTGA-3′ProbeB1：5′-ATCCCATTTGAGTAAATTCAG-3′ProbeB2：5′-ATGATAATTCAGCCAAGCC-3′ProbeC1：5′-CTGTATTAGCTACATGACCGT-3′ProbeC2：5′-AGCTATTGGAGTTTGGTAGTT-3′所述1条阳性对照探针的基因序列是：PbP：5′-ATTTATTGAATGCTTCGATAT-3′所述4条阴性对照探针的基因序列分别是：PbEC：5′-GATGAGAATGTGCCTTCGGGAA-3′PbSA：5′-GAACATATGTGTAAGTAACTGTGC-3′PbHBV：5′-AGAAAGACCTTTAACCTA-3′PbPSE：5′-TAGGTGGTTCAGCAAGTTGGAT-3′上述的人轮状病毒组特异性检测探针，阳性对照探针和阴性对照探针以poly(dT)15作为连接臂，并在探针5′端加入带氨基的六碳基团，其中，所述阳性对照探针在其3′端带荧光标记；上述每种探针与对照及空白的点涂层以2×2方式在玻璃基片表面点制4个平行点，各点的直径为0.15mm，同种探针或对照或空白点间距为0.4mm；不同探针或对照点间距为0.5mm，点涂层微阵列的大小为3.5mm×3.5mm。