[发明专利]海洋碳样小单孢菌产生的异黄酮类化合物—染料木素和大豆黄素

摘要

海洋碳样小单孢菌产生的异黄酮类化合物—染料木素和大豆黄素属于异黄酮类化合物的制备。该化合物经由Micromonospora sp.FIM 02－635的培养发酵以及Micromonospora sp.FIM 02－635代谢产物的分离纯化步骤制备。从海洋小单孢菌Micromonospora carbonacea sp.FIM 02－635中获得这类次级代谢产物尚属首次报道。已报道染料木素确实具有免疫抑制活性，其能否作为免疫抑制剂得到应用有待进一步的实验。

主权项

1.海洋碳样小单孢菌产生的异黄酮类化合物-染料木素和大豆黄素，其特征在于：该化合物由下述步骤制备：(1)Micromonospora sp.FIM 02-635的培养发酵：一铂环的Micromonosporasp.FIM02-635高氏天冬素斜面培养物接入液体种子培养基，32℃振荡培养48小时，以10％接种量移入发酵培养基，32℃，240rpm振荡培养96～120小时生物活性达高峰放瓶，收获菌丝体；(2).Micromonospora sp.FIM 02-635代谢产物的分离纯化：Micromonosporasp.FIM 02-635菌株发酵液离心获得菌丝体，菌丝体用二倍体积乙醇浸泡两次，乙醇浸泡液减压浓缩；乙醇浓缩液用乙酸乙酯提取两次，减压浓缩至浆状物；浆状物用硅胶柱分离，石油醚∶丙酮梯度洗脱，HPLC检测(Shimadzu LC-10ATvp高效液相仪；SPD-10AVvp检测器ODS C18分析柱(250mm×4.6mm，5μm)。流动相40％甲醇，检测波长250nm，柱温50℃，流速1.0ml/min)，合并有效组分减压浓缩得FW635粗品。FW635粗品经高速逆流萃取(HSCCC，TBE-300高速逆流色谱仪(深圳同田生化技术有限公司)；分离体系为氯仿∶甲醇∶水(4∶3∶2)，下相为流动相，流动相洗脱流速2ml/min，螺旋柱转速800rpm)，HPLC检测得高压液相纯度99％的样品FW635I1和FW635I2。