[发明专利]獐牙菜苦苷单体的分离纯化方法

摘要

本发明公开了川东獐牙菜(Swertia davida Franch)中有效成分獐牙菜苦苷(Swertiamarin)单体的分离纯化方法。本发明方法以大孔吸附树脂S－8为预分离填料，含水乙醇为洗脱剂；再以硅胶G柱色谱纯化，乙酸乙酯－甲醇为洗脱剂解析，层析产品经析晶脱色处理，最终冷冻干燥得到98％獐牙菜苦苷纯品。本发明方法与原有传统工艺相比，采用常规廉价填料为分离介质，优化了产品分离纯化、脱色与干燥技术，方法简便，制备周期短，成本低，单体提取率及产品纯度高，可实现工业化生产。

主权项

1、一种獐牙菜苦苷单体的分离纯化方法，其特征在于该方法包括下列步骤：(1)大孔吸附树脂预分离：a.用75％含水乙醇以川东獐牙菜重量的8倍量、7倍量和5倍量分三次从川东獐牙菜提取獐牙菜苦苷，合并提取液除去乙醇后浓缩到含固量为5％的料液待上柱；b.取大孔吸附树脂，用95％乙醇浸泡过夜充分溶胀后，装入层析柱，用95％乙醇淋洗树脂杂质，以纯水洗涤树脂至无乙醇残留，平衡备用；c.取步骤a的料液，常温下以8ml/min流速进入层析柱吸附，以6倍量柱床体积纯水同流速洗涤杂质，50％乙醇为解析溶剂，流速10ml/min，吸集洗脱液，浓缩回吸溶剂后60℃真空干燥得到獐牙菜苦苷分离物；d.步骤c獐牙菜苦苷分离物用以水饱和的乙酸乙酯70℃回流提取1小时，浓缩提取液，回收溶剂后低温(40℃)真空干燥得到獐牙菜苦苷高纯品；(2)硅胶柱色谱纯化：a.烘干后的硅胶以乙酸乙酯为溶剂装柱，用乙酸乙酯淋洗平衡；b.取上述獐牙菜苦苷高纯品；以甲醇溶解，用硅胶拌匀后湿法装柱；c.常温下将洗脱剂乙酸乙酯∶甲醇7∶3V/V加入柱内，待獐牙菜苷高纯品完全渗入硅胶后，用收集器收集洗脱液，洗脱流速1.5ml/min，以200ml为一个收集部份的馏分，合并第8-15馏分，浓缩除去溶剂后，冷冻干燥得獐牙菜苷单体纯化粗品；(3)脱色干燥：取步骤(2)纯化的单体粗品，以无水乙醇超声溶解，缓慢加入石油醚，搅拌结晶，冷却4℃放置过夜，过滤除去滤液，晶体在30℃下冷冻干燥得到獐牙菜苦苷纯品。