[发明专利]一种低抗原性重组葡激酶突变体及制备方法

摘要

本发明属突变或遗传工程领域，本发明公开了一种葡激酶的低抗原性突变体的制备方法及用途。SAK的前6位氨基酸与溶栓活性无关，但会影响其在一些原核细胞中的稳定性。同时，其中35、74、80、82、130、135和136位氨基酸所在的区段具有多个B淋巴细胞表位，因此通过片段缺失、点突变等方法去除了SAK的前6位氨基酸，构建了N端缺失、中间和C末端区段多点修饰的SAK突变体。该突变体的溶栓活性没有明显变化，而突变体的抗原性显著降低。本发明的突变体适合于原核细胞中的表达和制备，给工业生产带来了便利。由于其生物学活性与野生型相比没有显著差异，可用于溶解血栓，其抗原性降低的特点可能使其多次应用成为可能。

主权项

1、一种低抗原性重组葡激酶突变体，其特征是：GGA AAA TAT AGA AAA GGC GAT GAC GCG AGT TAT TTT GAA CCA ACA GGCGly Lys Tyr Arg Lys Gly Asp Asp Ala Ser Tyr Phe Glu Pro Thr GlyCCG TAT TTG ATG GTA AAT GTG ACT GGA GTT GAT GGT GCA GGA AAT GAA TTG CTA TCC CCT CGT TATPro Tyr Leu Met Val Asn Val Thr Gly Val Asp Gly Ala Gly Asn Glu Leu Leu Ser Pro Arg TyrGTC GAG TTT CCT ATT AAA CCT GGG ACT ACA CTT ACA AAA GAA AAA ATT GAA TAC TAT GTC GAA TGG GCAVal Glu Phe Pro Ile Lys Pro Gly Thr Thr Leu Thr Lys Glu Lys Ile Glu Tyr Tyr Val Glu Trp AlaTTA GAT GCG ACA GCA TAT CAA GAG TTT AGA GTA GTT GCA TTA GCG CCA AGC GCA AAG ATC GAA GTC ACTLeu Asp Ala Thr Ala Tyr Gln Glu Phe Arg Val Val Ala Leu Ala Pro Ser Ala Lys Ile Glu Val ThrTAT TAT GAT AAG AAT AAG AAA AAA GAA GAA ACG AAG TCT TTC CCT ATA ACA GAA AAA GGT TTT GTT GTCTyr Tyr Asp Lys Asn Lys Lys Lys Glu Glu Thr Lys Ser Phe Pro Ile Thr Glu Lys Gly Phe Val ValCCA GAT TTA TCA GAG CAT ATT AAA AAC CCT GGA TTC AAC TTA ATT ACA GCG GTT GTT ATA GAA CGT GCGPro Asp Leu Ser Glu His Ile Lys Asn Pro Gly Phe Asn Leu Ile Thr Ala Val Val Ile Glu Arg Ala