[发明专利]一种高活性、低抗原性葡激酶衍生体及制备方法

摘要

本发明属突变或遗传工程领域，本发明公开了一种溶栓活性升高、免疫原性降低的SAK衍生体的制备方法及用途。研究发现SAK的前10位氨基酸缺失后，其溶栓活性基本能保持不变，其中35、74、82、130、135和136位等氨基酸所在的区段具有多个B淋巴细胞表位，因此通过片段缺失、点突变方法删除了SAK的前10位氨基酸构建了N端缺失、及上述位点修饰的SAK突变体，在SAK分子的C末端添加1个赖氨酸，构建SAK衍生体。该突变体的溶栓活性有明显提高。由于屏蔽了SAK分子中的一些抗原表位，突变体的抗原性显著降低。本发明的突变体适合于原核细胞中的表达和制备，由于其高溶栓活性和低抗原性，有望研制成为治疗心脑血管疾病治疗方面的新型药物。

主权项

1、一种高活性、低抗原性葡激酶衍生体，其特征是：构建的SAK衍生体序列为：AAA GGC GAT GAC GCG AGT TAT TTT GAA CCA ACA GGCLys Gly Asp Asp Ala Ser Tyr Phe Glu Pro Thr GlyCCG TAT TTG ATG GTA AAT GTG ACT GGA GTT GAT GGT GCA GGA AAT GAA TTG CTA TCC CCT CGT TATPro Tyr Leu Met Val Asn Val Thr Gly Val Asp Gly Ala Gly Asn Glu Leu Leu Ser Pro Arg TyrGTC GAG TTT CCT ATT AAA CCT GGG ACT ACA CTT ACA AAA GAA AAA ATT GAA TAC TAT GTC GAA TGG GCAVal Glu Phe Pro Ile Lys Pro Gly Thr Thr Leu Thr Lys Glu Lys Ile Glu Tyr Tyr Val Glu Trp AlaTTA GAT GCG ACA GCA TAT CAA GAG TTT AGA GTA GTT GAA TTA GCG CCA AGC GCA AAG ATC GAA GTC ACTLeu Asp Ala Thr Ala Tyr Gln Glu Phe Arg Val Val Glu Leu Ala Pro Ser Ala Lys Ile Glu Val ThrTAT TAT GAT AAG AAT AAG AAA AAA GAA GAA ACG AAG TCT TTC CCT ATA ACA GAA AAA GGT TTT GTT GTCTyr Tyr Asp Lys Asn Lys Lys Lys Glu Glu Thr Lys Ser Phe Pro Ile Thr Glu Lys Gly Phe Val ValCCA GAT TTA TCA GAG CAT ATT AAA AAC CCT GGA TTC AAC TTA ATT ACA GCG GTT GTT ATA GAA CGT GCGPro Asp Leu Ser Glu His Ile Lys Asn Pro Gly Phe Asn Leu Ile Thr Ala Val Val Ile Glu Arg Ala AAALys