[发明专利]含马兜铃酸及其内酰胺类成分的体内样品的测定方法

摘要

本发明涉及同时测定血液(血浆、血清、红细胞)、组织(心、肝、脾、肺、肾、脑、胃、膀胱)中马兜铃酸及马兜铃内酰胺类成分的高效液相色谱方法，其特点为样品经盐酸酸化后经乙酸乙酯提取，采用配备二极管阵列检测器的高效液相色谱仪和十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱，流动相为1％冰醋酸/30mmol·L^－1三乙胺－乙腈梯度洗脱，柱温15℃，检测波长分别为250nm(马兜铃酸类成分)、260nm(马兜铃内酰胺类成分)。该方法中所述的血液包括人、大鼠、小鼠、兔子等；组织包括大鼠、小鼠、兔子等。该方法能很好地将样品中的被测成分与内源性物质有效的分开，从而测定其各自的含量，具有灵敏度高、专属性强，分析结果重现性良好的特点。

主权项

1.一种含马兜铃酸类及马兜铃内酰胺类成分的生物样品的预处理方法，其特征在于：取0.5～1.5ml生物样品，加入盐酸(每毫升生物样品中盐酸浓度范围在3.0×10-5～1.0×10-4mol·L-1 内)后涡旋混匀，室温放置30～60min，然后采用乙酸乙酯萃取1～2次，每次1.5～5.0ml，涡旋混合萃取，收集上清液，在60℃以下的水浴上用氮气(N2)挥干，加入150μl甲醇溶解残渣，过滤，供进样做高效液相色谱分析。方法中所述的生物样品来源包括人、大鼠、小鼠和兔子等的血浆样品、血清样品和红细胞溶液样品(吸取等量的红细胞和蒸馏水于离心管中，涡旋混合，静置使红细胞破裂溶解后得到红细胞溶液)以及大鼠、小鼠和兔子等的组织匀浆液样品(称取适量组织样品包括心、肝、脾、肺、肾、脑、胃、膀胱等，按照每克组织样品加入4ml生理盐水的比例，制备组织匀浆液)等；方法中所述的马兜铃酸类及马兜铃内酰胺类成分包括马兜铃酸I、马兜铃酸II、马兜铃内酰胺I和马兜铃内酰胺II。