[发明专利]利用亲水/疏水复合膜中的微结构固定化脂肪酶的方法

摘要

一种利用亲水/疏水复合膜中的微结构固定化脂肪酶的方法，属于生物工程中的酶固定化领域。本发明先将亲水性膜材料醋酸纤维素溶解在二甲基甲酰胺中，制成亲水性膜液，再将疏水性聚四氟乙烯膜平铺在玻璃板上，将亲水性膜液刮涂在其表面，利用干－湿相转换法制备得到由致密亲水层和多孔疏水层组成的复合膜，并通过过滤的方法，利用其微结构实现脂肪酶的固定化。本发明与现有的脂肪酶膜固定化方法相比，具有以下优点：利用物理的方法实现了脂肪酶的固定化，方法简单，成本低；脂肪酶在固定化过程中活力损失小，制备得到的固定化脂肪酶膜活力及其活力回收率高；酶的负载量容易控制；固定化酶膜的使用稳定性较好；载体可以再生重复使用，降低了成本。

主权项

1.一种利用亲水/疏水复合膜中的微结构固定化脂肪酶的方法，该方法按如下步骤进行：1)将亲水性膜材料醋酸纤维素溶解在二甲基甲酰胺中，制备得到质量分数为10％-20％的膜液，静置脱除气泡；2)将疏水性聚四氟乙烯膜平铺在玻璃板上，将步骤1)制备的亲水性膜液刮涂在其表面，利用干—湿相转换法使其成膜，制备得到由致密亲水层和多孔疏水层组成的复合膜；3)将脂肪酶溶解在磷酸钠缓冲溶液中，充分溶解后滤去溶液中的不溶物，得到酶蛋白浓度为84-167mg/L的脂肪酶溶液；4)将步骤2)制备的亲水/疏水复合膜装入一个死端过滤器，使其疏水层向上，将不同体积步骤3)制备的脂肪酶溶液注入过滤器，在0.3-0.6Mpa压力下进行过滤，实现脂肪酶的固定化。