[发明专利]柞蚕溶菌酶的基因序列及其表达产物的制备方法有效
申请号: | 200510130926.3 | 申请日: | 2005-12-08 |
公开(公告)号: | CN1873009A | 公开(公告)日: | 2006-12-06 |
发明(设计)人: | 范琦;张波;王林美;李树英;叶博 | 申请(专利权)人: | 辽宁省农业科学院大连生物技术研究所 |
主分类号: | C12N15/56 | 分类号: | C12N15/56;C12N9/36 |
代理公司: | 大连东方专利代理有限责任公司 | 代理人: | 赵淑梅 |
地址: | 116023辽宁省大连*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | 柞蚕溶菌酶基因是用大肠杆菌诱导柞蚕蛹,取柞蚕蛹脂肪体,提取总RNA,反转录成cDNA。根据已知溶菌酶基因的序列,设计简并引物,用RLM-RACE方法分别获得柞蚕溶菌酶基因5’端和3’端非编码区基因片段,并进行序列分析。根据测序结果,设计引物,通过PCR扩增得柞蚕溶菌酶基因编码区片段,并推测出编码的氨基酸序列。柞蚕溶菌酶基因编码区核酸序列为420bp,编码140个氨基酸,其中前20个氨基酸为信号肽序列,成熟肽部分为120个氨基酸;预测分子量为13,986,等电点为pI8.46。120个氨基酸的基因片断经克隆、转化、筛选、培养、分离和层析纯化得到其表达产物。 | ||
搜索关键词: | 柞蚕 溶菌酶 基因 序列 及其 表达 产物 制备 方法 | ||
【主权项】:
1.一种溶菌酶基因序列,其特征在于是柞蚕溶菌酶基因序列,其完整的cDNA序列为: aaaatacgtctaacgacatcgacgcaggtgacacgcgtttaaaaATGTTCAAGTATATTGTTTTGTTTGCCGTTTTGGCTCTGTCTTTGCATAATTGCGAG GGGAAATGGTTTACCAAATGTGGGCTAGTGCACGAGCTGAGGAGACAAGGCTTCGACGAGAGCCTAATGCGGGACTGGGTCTGTCTCGTTGAGAACGAAAGCAGCCGTTATACTAATAAAATCGGTAAAGTGAATAAGAATGGCTCACGAGACTACGGCCTCTTCCAGATCAATGACAAATATTGGTGTAGTAAGACCTCCACCCCCGGAAAGGATTGCAATGTGACTTGTAATCAGCTCTTGACTGACGATATTACAGTCGCGGCGACCTGCGCGAAAAAGATTTACAAACGCCATAAGTTTAACGCTTGGTACGGATGGTTAAACCACTGCCAACACTCTCTTCCAGACATTAGCGACTGTTAAgaaaacgcttgtggaagcaaactaagtaaatctcgttatttcatctctgaaaataaaagaagtaatattacaaaagaatgctctcgaaaaacaaaatttaactattatttcgtgtttacattgtgatagatattgttattatttaaacacaaagccttttctacttttttacatatgagaaataaagacttcataacaaaaaa其中:大写字母表示柞蚕溶菌酶基因编码区的碱基序列:有下划线的部分为柞蚕溶菌酶信号肽碱基序列,黑体大写字母部分为柞蚕溶菌酶成熟肽碱基序列;其余小写字母部分分别为柞蚕溶菌酶基因的5’端和3’端非编码区碱基序列。
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