[发明专利]凝胶阻滞色谱柱上聚合制备窄分布低分子量聚合血红蛋白的方法无效
| 申请号： | 200510136022.1 | 申请日： | 2005-12-28 |
| 公开（公告）号： | CN1990038A | 公开（公告）日： | 2007-07-04 |
| 发明（设计）人： | 杨成民;王翔;黄磊;李燊;张鸿辉;梁伟光;李洪英;许丽丽;王劲峰;由英才 | 申请（专利权）人： | 天津协和生物科技发展有限公司 |
| 主分类号： | A61K38/42 | 分类号： | A61K38/42;C08H1/00;C07K14/805;A61P7/08 |
| 代理公司： | 国嘉律师事务所 | 代理人： | 卢枫 |
| 地址： | 300457天津市经济技术*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 一种凝胶阻滞色谱柱上聚合制备窄分布低分子量聚合血红蛋白的方法，它将天然血红蛋白用泵加入凝胶阻滞色谱中平衡，然后分布加入双功能交联剂进行聚合反应，反应温度为0～30℃，pH值为5.0～9.0反应时间3～10小时；血红蛋白溶液浓度为1～100mg/ml，血红蛋白与双功能交联剂的摩尔比为1∶10～1∶50。用氨基的缓冲溶液将生成的聚合产物洗脱、收集。收集液用甘氨酸或赖氨酸中止反应，戊二醛与甘氨酸(赖氨酸)的摩尔比为2～3∶1。超滤浓缩。采用硼氢化钠对得到的聚合血红蛋白进行还原处理后，再用超滤、层析等方法对该产物进行分离纯化，得到窄分布、平均分子量在200kD以下的聚合血红蛋白。 | ||
| 搜索关键词： | 凝胶 阻滞 色谱 聚合 制备 分布 分子量 血红蛋白 方法 | ||
【主权项】：
1、一种凝胶阻滞色谱柱上聚合制备窄分布低分子量聚合血红蛋白的方法，其特征在于它包括以下步骤：(1)将天然血红蛋白进行化学修饰或预聚合。(2)将修饰或预聚合的血红蛋白充分脱氧后用泵加入凝胶阻滞色谱柱中平衡，然后分步加入双功能交联剂进行聚合反应，血红蛋白溶液浓度为1～100mg/ml，血红蛋白与双功能交联剂的摩尔比为1∶10～1∶50。(3)用缓冲溶液将步骤1生成的聚合产物洗脱、收集。收集液用甘氨酸或赖氨酸中止反应，戊二醛与甘氨酸(赖氨酸)的摩尔比为2～10∶1，反应时间1～3小时。最后超滤浓缩。(4)采用硼氢化钠对得到的聚合血红蛋白进行还原处理后，再用超滤、层析等方法对该产物进行分离纯化，得到窄分布、平均分子量在200kD以下的聚合血红蛋白。
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