[发明专利]高转化率高纯度糖化酶浓缩液的生产方法

摘要

一种高转化率高纯度糖化酶浓缩液的生产方法，主要包括：在一级种子罐中按配比装入碳原、玉米浆、硫酸铵和水；在二级种子罐中按配比装入碳原、豆饼粉，α－淀粉酶、生物素和水；在发酵罐中按配比装入碳原、豆饼粉、流加的液氨、α－淀粉酶、生物素和水；在纯化预处理罐中按配比装入钠基膨润土和经酸化处理后的水；将黑曲霉菌种按配比接种到一级种子罐培养；将培养的菌种及原料移入二级种子罐扩大培养；将扩大培养的菌种及原料移入发酵罐发酵；接下来将成熟发酵液放入纯化预处理罐进行纯化预处理，随后进行固液分离、浓缩、精滤、除菌和理化检测，调配后即得成品酶。本发明的有益效果是，可大幅度提高糖化酶系纯度，明显提高葡萄糖转化率(D E值)。

主权项

1、一种高转化率高纯度糖化酶浓缩液的生产方法，其特征在于：(a)在一级种子罐中按下列重量配比装入用于种子培养的原料：8～17％的碳原，1～3％的玉米浆，1～2％的硫酸铵，80％～88％的水；(b)在二级种子罐中按下列重量配比装入用于种子培养的原料：8～17％的碳原，2～4％的豆饼粉，0.01～0.015％的α-淀粉酶，0.008～0.01％的生物素，80％～88％的水；且二级种子罐和一级种子罐用于种子培养的总原料分别按78％～88％比12～22％的重量比例进行配置；(c)在发酵罐中按下列重量配比装入用于种子培养后进行发酵的原料：15～27％的碳原，3～7％的豆饼粉，0.3～0.5％的硫酸铵，2～7％流加的液氨，0.025～0.05％的α-淀粉酶，0.005～0.01％的生物素，62％～75％的水；且发酵罐用于发酵的总原料和二级种子罐用于种子培养的总原料分别按82～90％比10～18％的重量比例进行配置；(d)在纯化预处理罐中按下列重量配比装入用于经发酵后进行纯化预处理的原料：2～5％的钠基膨润土，95％～98％的经酸化处理后的水；(e)在已装入种子培养原料的一级种子罐中按下列重量配比接入黑曲霉菌种：0.05～0.6％的黑曲霉菌种，99.4～99.95％的一级种子罐用于种子培养的总原料重量；一级种子罐内培养温度为34℃±1℃，压力为0.08～0.1Mpa，通气量为1∶1～1.2，初发酵PH值为4.8～5.0，培养时间为25～40hr；(f)将培养成熟的一级种子罐菌种液移至二级种子罐中进行扩大培养，培养温度为34℃±1℃，罐内压力为0.05～0.08Mpa，通气量为1∶0.7～1，初发酵PH值为4.8～5.0，中期用流加液氨的方法控制PH值为4.7±1，培养时间为35～50hr；(g)将二级种子罐中培养成熟的菌种液移至装入发酵原料的发酵罐中进行发酵培养，发酵温度为34℃±1℃，罐内压力为0.05～0.07Mpa，通气量为1∶0.5～1，初发酵PH值为4.8～5.0，当PH值下降至4.5左右时，用流加液氨的方法控制PH值为4.7±1，发酵过程中，当DE值下降至25-30时，以每小时2.5～1000L的耗用量，添加灭菌糖浆进行补料，保持在发酵过程中发酵液合理的碳、氮比和渗透压，发酵时间为135～170hr；(h)发酵完成后将成熟发酵液放入已装好预处理原料的纯化预处理罐中进行纯化预处理，处理温度为20℃～30℃，PH值为2.8～3.2，处理时间为1.5～3hr，发酵液经预处理后通过板框压滤机进行固液分离，分离后的酶液再进行超滤浓缩，浓缩后的酶液进行精滤除菌，精滤除菌后的酶液经理化检测合格后进行调配，即得成品酶。