[发明专利]一种大黄鱼精子遗传物质完全失活的方法

摘要

本发明公开一种适用于大黄鱼精子遗传物质完全失活的方法，可以用于大黄鱼雌核发育和其全雌苗种诱导的研究和生产。方法为：采用预冷的含有营养成分的稀释液将大黄鱼成熟精液稀释20～100倍后放于平底培养皿中，用紫外光源照射后，与大黄鱼卵子受精并孵育，而后对精子遗传灭活的效果进行鉴定。本发明具有方法简单，所需设备少，便于操作，精子遗传物质灭活率能够达到100％，且精子仍具有活力可以正常启动卵子发育等优点。为实现大规模雌核发育和全雌大黄鱼诱导奠定了基础。

主权项

1、一种大黄鱼精子遗传物质完全灭活的方法，包括：精液保存、精液稀释、精子遗传物质失活，其特征在于：①精液保存：将人工挤出的未激活的大黄鱼成熟精液避光保存于2～4℃低温条件下备用；②精液稀释：采用预冷的稀释液稀释所述大黄鱼成熟精液，稀释倍数为20～100倍，然后将稀释后的大黄鱼成熟精液放入已预冷到0～5℃的培养皿中，其培养皿中稀释后的大黄鱼成熟精液液体厚度为0.1～0.3cm；其中：按重量体积百分比计所述预冷的稀释液成份为NaCl 0.60～0.80％，KCl 0.03～0.05％，CaCl2，0.01～0.03％，葡萄糖0.05～0.10％；pH，7.0～7.3；稀释液预冷到0～5℃；③精子遗传物质失活：紫外光源预热5～10min后，将带有稀释后的大黄鱼成熟精液的培养皿置于紫外光源下，照射1.5～5min，使得大黄鱼遗传物质失活；其中：紫外光源的照射剂量为1800～6000erg/mm2。