[发明专利]标记试剂、合成这样的试剂的方法和检测生物分子的方法

摘要

本发明涉及具有式(0)的温度稳定的标记试剂，其中R¹表示H或者烷基、芳基或取代的芳基；R²表示可检测的标记或者通过至少一个多聚体结构而相互连接的至少两个可检测的标记；L是包含至少两个共价键的直链的连接臂和n是等于0或1的整数；R³和R⁴彼此独立地表示H、NO₂、Cl、Br、F、I、R²－(L)_n－Y－X－、OR、SR、NR₂、R、NHCOR、CONHR、COOR、－CO－NH－(CH₂)₃－(O－CH₂－CH₂)₃－CH₂－NH－R²、－CO－NH－(CH₂)₃－(O－CH₂－CH₂)₄－CH₂－NH－R²，其中R为烷基或芳基；A是包含至少一个共价双键的连接臂，其使得重氮基官能团能够与芳环缀合，和u是0和2之间的整数，优选0或1；－Y－X－表示－CONH－、－NHCO－、－CH₂O－、－CH₂S－；－Z－表示－NH－、－NHCO－、－CONH－或－O－；m是1和10之间的整数，优选1和3之间的整数；和p是1和10之间的整数，优选1和3之间的整数。本发明还涉及合成所述标记的方法，以及其用于用具有重氮基甲基官能团的标记试剂来标记生物分子(特别是核酸)的用途。本发明特别适合用于诊断领域。

主权项

1.式(0)的温度稳定的标记试剂：其中，·R¹表示H或者烷基、芳基或取代的芳基，·R²表示可检测的标记或者通过至少一个多聚体结构而相互连接的至少两个可检测的标记，·L是包含至少两个共价键的直链的连接臂，和n是等于0或1的整数，·R³和R⁴彼此独立地表示H、NO₂、Cl、Br、F、I、R²-(L)_n-Y-X-、OR、SR、NR₂、R、NHCOR、CONHR、COOR、-CO-NH-(CH₂)₃-(O-CH₂-CH₂)₃-CH₂-NH-R²、-CO-NH-(CH₂)₃-(O-CH₂-CH₂)₄-CH₂-NH-R²，其中R为烷基或芳基，·A是包含至少一个共价双键的连接臂，其使得重氮基官能团能够与芳环缀合，和u是0和2之间的整数，优选0或1，·-Y-X-表示-CONH-、-NHCO-、-CH₂O-、-CH₂S-，·-Z-表示-NH-、-NHCO-、-CONH-或-O-，·m是1和10之间的整数，优选1和3之间的整数，和·p是1和10之间的整数，优选1和3之间的整数。