[发明专利]纯化质粒DNA的方法无效
申请号: | 200580011784.7 | 申请日: | 2005-04-19 |
公开(公告)号: | CN101006170A | 公开(公告)日: | 2007-07-25 |
发明(设计)人: | 弗朗西斯·布兰切;迈克尔·库代尔;尼古拉斯·梅斯特拉里;蒂瑞·吉尔明;戴维·盖拉克 | 申请(专利权)人: | 森特利昂公司 |
主分类号: | C12N1/06 | 分类号: | C12N1/06;C12N15/10;C12Q1/68 |
代理公司: | 北京市柳沈律师事务所 | 代理人: | 张文辉;巫肖南 |
地址: | 法国塞纳*** | 国省代码: | 法国;FR |
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摘要: | 本发明提供连续的碱裂解细菌悬浮液以收集pDNA的方法。它还给定了可选的附加纯化步骤,包括裂解物过滤,阴离子交换色谱,三螺旋亲和色谱和疏水相互作用色谱。这些可选的纯化步骤可以和所述连续裂解结合以提供基本上不含gDNA,RNA,蛋白质,内毒素和其他污染物的高度纯化的pDNA产物。 | ||
搜索关键词: | 纯化 质粒 dna 方法 | ||
【主权项】:
1.制备药物级质粒DNA组合物的方法,包括提供含有质粒DNA的细胞提取物,其中所述细胞已通过碱裂解而被裂解,且细胞膜和基因组DNA已通过初步抽提或过滤而被去除;然后进行至少两个色谱步骤,一个步骤为三螺旋色谱步骤,第二个步骤选自阴离子交换色谱、凝胶渗透色谱和疏水相互作用色谱,其中所制备的组合物具有少于约0.0001%的宿主细胞基因组DNA污染物。
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