[发明专利]组装多表达构建体的方法

摘要

本发明涉及通过定向重组克隆用多基因表达盒组装构建体的方法。提供具有改造的重组位点的DNA和载体用于重组克隆方法，其使得能够在一个重组克隆步骤中将多个表达盒有效和特异地组装成一个多表达构建体。

主权项

1.产生包含至少两个不同表达盒的多表达构建体的方法，所述方法包括在体外或体内组合i)一个或更多插入片段供体分子，所述插入片段供体分子一起包含至少两个插入片段I(n)，每个插入片段包含至少一个表达盒，所述插入片段侧翼为两个不同的重组位点A(2n)和A(2n+1)，其中n是表征每个插入片段的从1到m的整数，且m是不同插入片段的总数，和ii)插入片段受体分子IA，其包含两个不同的重组位点A1和A(2m+2)，其中m是步骤i)的不同插入片段的总数，其中所有重组位点A(1)到A(2m+2)不同，并且特定i的重组边A(2i-1)可以与相同i的重组边A(2i)重组，但基本不与另一重组位点重组，所述i是从1到m+1的整数，和iii)至少一种位点特异性重组蛋白质，其能够重组所述插入片段供体分子和所述插入片段受体分子中的所述重组位点，且在足以将全部所述插入片段转移入所述插入片段受体分子的条件下温育所述组合，由此产生多表达构建体。