[发明专利]使用腈水解酶突变体生产3-羟基羧酸有效
申请号: | 200580035301.7 | 申请日: | 2005-08-16 |
公开(公告)号: | CN101072871A | 公开(公告)日: | 2007-11-14 |
发明(设计)人: | M·S·佩恩;R·迪科西莫;D·P·奥基夫 | 申请(专利权)人: | 纳幕尔杜邦公司 |
主分类号: | C12N9/78 | 分类号: | C12N9/78;C12Q1/34 |
代理公司: | 中国专利代理(香港)有限公司 | 代理人: | 李波;刘玥 |
地址: | 美国特*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | 该发明涉及具有改善的用于将3-羟基腈转化为3-羟基羧酸的腈水解酶活性的腈水解酶突变体。更具体地说,使用易错PCR和位点定向诱变突变敏捷食酸菌72W(ATCC 55746)腈水解酶基因以产生具有改善的用于将3-羟基腈(如3-羟基丁腈或3-羟基戊腈)转化为相应的3-羟基羧酸的腈水解酶活性的腈水解酶。也提供了一种使用所述改善的突变体生产3-羟基羧酸的方法。 | ||
搜索关键词: | 使用 水解 突变体 生产 羟基 羧酸 | ||
【主权项】:
1.一种编码如SEQ ID NO:4的氨基酸序列所示的酶促活性多肽的分离的核酸分子,所述分离的核酸分子进一步包含至少一个引起SEQ ID NO:4的至少一个氨基酸取代的突变,所述取代选自:a)在第210位用丙氨酸、异亮氨酸或半胱氨酸取代;b)在第65位用半胱氨酸取代;c)在第168位用赖氨酸、缬氨酸或亮氨酸取代;和d)在第174位用异亮氨酸取代,其中所述核酸分子编码一种多肽,当在相同的反应条件下将3-羟基戊腈转化为3-羟基戊酸时,所述多肽与敏捷食酸菌72W(ATCC55746)腈水解酶的活性相比具有至少高1.8倍的腈水解酶活性。
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