[发明专利]改良的丙氨酸2,3－氨基变位酶和相关多核苷酸

摘要

本发明涉及一种相对于野生型酶具有增强的丙氨酸2，3－氨基变位酶(AAM)活性和/或热稳定性的多肽，所述野生型酶由于与丙氨酸的交叉反应性而具有偶然的AAM活性。另外，本发明涉及编码本发明的AAM多肽的多核苷酸，包含所述多核苷酸的核酸序列，包含可操作地连接至启动子的多核苷酸的表达载体，经转化以表达AAM多肽的宿主细胞和用于制造本发明的AAM多肽的方法。

主权项

1.一种具有丙氨酸2，3-氨基变位酶活性和具有以下条件的多肽(如下称为“AAM多肽”)(a)具有选自由SEQ ID NO：2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、44、46、48和51组成的群组的氨基酸序列；(b)具有与选自由SEQ ID NO：2、22、28、32和36组成的群组的氨基酸序列有至少98％的同源性的氨基酸序列；(c)具有与选自由SEQ ID NO：4、6、8、12、16、24、26、30、34和40组成的群组的氨基酸序列有至少99％的同源性的氨基酸序列；(d)为由在高严格条件下与任一以下各物杂交的核酸序列编码的多肽：(i)SEQID NO：1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、41、43、45、47或49的核苷酸序列，(ii)至少100个核苷酸的(i)的子序列，或(iii)(i)或(ii)的互补链；或(e)为(d)的多肽的变异体，其包含由其取代、缺失和/或插入1至6个氨基酸且具有于pH7.0-7.6，25℃下约1至约30μM所产生的β-丙氨酸/小时/1细胞OD的AAM活性。