[发明专利]核酸薄膜层析快速检测方法及其试纸条及其用途无效
申请号: | 200610003429.1 | 申请日: | 2006-02-08 |
公开(公告)号: | CN1811447A | 公开(公告)日: | 2006-08-02 |
发明(设计)人: | 尤其敏;胡林;林源吉;吴汀滢;罗英 | 申请(专利权)人: | 杭州优思达生物技术有限公司 |
主分类号: | G01N33/558 | 分类号: | G01N33/558;G01N33/544;G01N21/78;G01N33/52 |
代理公司: | 北京东方汇众知识产权代理事务所 | 代理人: | 刘淑芬 |
地址: | 310012浙江省杭州市*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明公开了一种特异性核酸序列扩增物的单探针检测方法,还公开了一种特异性核酸序列扩增物的双探针检测方法,还公开了用于核酸扩增物检测的试纸条,以及试纸条的用途。本发明的方法使用通用的抗体A和抗体B,因而用本发明方法制作的标准试纸条可用于检测任何来源的核酸序列扩增物,其特异性由扩增引物和探针共同保证。 | ||
搜索关键词: | 核酸 薄膜 层析 快速 检测 方法 及其 试纸 用途 | ||
【主权项】:
1、一种特异性核酸序列扩增物的检测方法,其包括:1)将一种特异性抗体,抗A抗体吸附于有色颗粒,如胶体金颗粒、乳胶颗粒等,在颗粒表面形成抗体包被;2)将另一种特异性抗体,无色的抗B抗体以线条状固定于膜上形成检测线,所述膜通常为硝酸纤维膜或尼龙膜;3)当存在待检的核酸时,发生特异性核酸扩增,其中的一条引物用抗原A标记,形成一条链带有抗原A的核酸扩增物;4)将步骤3)得到的带有抗原A的核酸扩增物链与一条用抗原B标记的探针杂交,形成扩增物抗原A-探针抗原B杂交物;5)将步骤4)得到的扩增物抗原A-探针抗原B杂交物首先与颗粒表面抗体包被的抗体A结合,形成扩增物抗原A-颗粒抗体A-探针抗原B有色颗粒复合物;6)步骤5)得到的有色颗粒复合物在溶液中通过毛细现象沿纤维膜向上流动至抗体B检测线时,与线条上的抗体B结合,形成有色的扩增物抗原A-颗粒抗体A-探针抗原B-线条抗体B颗粒复合物(双抗体双抗原夹心),从而滞留在线上,形成肉眼可见的有色线条,此为阳性;或者7)当待检的核酸不存在时,不发生上述步骤3)-6),有色颗粒将不能与膜上的检测线结合而越过此线,不能形成肉眼可见的有色线条,此为阴性。
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