[发明专利]一种细脚拟青霉多糖分离纯化的方法

摘要

本发明公开一种细脚拟青霉多糖的分离纯化方法。由下述步骤组成：水提醇沉淀法提取细脚拟青霉多糖成分，阴离子交换层析和凝胶过滤层析反复色谱纯化，真空冷冻干燥细脚拟青霉多糖的提取物，即得细脚拟青霉多糖。利用本发明制备的细脚拟青霉多糖能够最大限度分离纯化细脚拟青霉多糖，既不影响多糖天然的结构又能保持其原有生物活性，且本发明的方法设备及环境要求低，方法简便，成本低，灵活实用，利于推广、开发和应用。

主权项

1.一种细脚拟青霉多糖的分离纯化方法，由下列步骤实现：(1)脱脂：将细脚拟青霉菌丝体粉碎，用有机溶剂以常规方式脱脂；(2)水提：步骤(1)所得的脱脂后细脚拟青霉菌丝体粉末按1∶6(W/V)的料液比加入蒸馏水，室温下浸提20～25小时；以3000～5000rpm离心15～30min，取上清液，得细脚拟青霉多糖水提物溶液；(3)去蛋白：步骤(2)所得的细脚拟青霉多糖水提物溶液用有机溶剂以常规方式去除其蛋白；(4)透析：步骤(3)所得的粗品浓缩，离心，弃不溶物，得上清液，用透析袋将上清液在流水中透析48h，再在去离子水中透析24小时，进一步去除寡糖、无机盐、色素等小分子杂质，收集细脚拟青霉多糖的提取液；(5)纯化：将经步骤(4)透析后的液体浓缩，经DEAE纤维素-52和葡聚糖凝胶层析，收集液用苯酚硫-酸法检测，合并多糖峰的收集液，真空冷冻干燥，得纯细脚拟青霉多糖。