[发明专利]能抑制HER2高表达肿瘤细胞增殖的稳定的小分子多肽

摘要

本发明公开了属于生物医学中生物治疗范围的一种能抑制HER2高表达肿瘤细胞增殖的稳定的小分子多肽PL45。该小分子多肽PL45为自行设计的靶向HER2S1－L2功能域的拮抗分子，由全合成的基因编码，克隆入表达质粒pET－22b；同时将TrxA插入pET－22b，以辅助PL45折叠，实现可溶性共表达。用表达载体转化BL21/DE3宿主菌，在LB培养基中培养，1mmol·L^－1 IPTG诱导表达，破菌取上清，应用Ni离子亲合层析柱纯化，咪唑缓冲液洗脱而获得纯化蛋白。本发明采用人细胞中天然存在的跨膜蛋白为骨架，应用原核表达体系制备，不仅大大地提高了表达量，而且克服了小分子多肽半寿期短、作用弱的缺陷。

主权项

1.一种能抑制HER2高表达肿瘤细胞增殖的稳定的小分子多肽，其特征在于：所述小分子多肽是自行设计的靶向HER2受体分子的小分子拮抗肽，采用人细胞中天然存在的跨膜蛋白为骨架，与拮抗肽相融合，其编码基因经重叠PCR拼接合成，插入表达质粒pET-22b；应用Ni离子亲合层析柱纯化，咪唑缓冲液洗脱获得纯化蛋白，命名为PL45，其氨基酸序列为：MNTSGDTGFDGYSGQNSGGGGSMDLAPQMLRELQETNAALQDVRELLRQQVKEITFLKNTVMECDAC。