[发明专利]共轭亚油酸的制备方法

摘要

本发明共轭亚油酸的制备方法涉及用发酵制备共轭亚油酸的方法，它是以盐生植物紫花苜蓿种籽为原料，采用微生物发酵来制备共轭亚油酸，具体步骤包括(1)培养基的配制、(2)种子液预培养，其中特别是将紫花苜蓿籽油和乳酸菌种加入到上述制得的培养基(1)中作为接种物、(3)乳酸菌发酵异构化，其中特别是将由第(2)步制得的接种物和紫花苜蓿籽油接入培养基中，经培养制得发酵液、(4)共轭亚油酸的提取，用异丙醇溶解发酵液，再用正己烷充分萃取发酵液即制得共轭亚油酸；本发明制备方法的主要原料紫花苜蓿籽购价低，制备工艺简单，反应条件温和，异构体组成单一。

主权项

1.一种共轭亚油酸的制备方法，其特征在于：它是以盐生植物紫花苜蓿种籽为原料，采用微生物发酵来制备共轭亚油酸的方法，具体步骤是：(1)培养基的配制将市购的牛肉浸膏8～12g、葡萄糖20g、柠檬酸铵1～3g、蛋白胨10～12g、酵母浸粉3～6g、乙酸钠4～6g、磷酸氢二钾1～3g、硫酸镁0.1～0.3g、硫酸锰0.03～0.06g、吐温801～2g混合加蒸馏水至一升，调节pH值为6.2～6.6，高压灭菌20分钟，得到培养基(1)；(2)种子液预培养在无菌条件下用移液枪将紫花苜蓿籽油5～30微升和乳酸菌种加入到上述制得的培养基(1)中，接种量为5％(v/v)，摇匀后于35～38℃预培养8～14小时作为接种物；(3)乳酸菌发酵异构化按照培养基(1)的配方配制培养基，并用磷酸钠缓冲溶液将pH值调到5.8～8.0，高压灭菌20分钟，得到培养基(2)，在无菌条件下用移液枪将由第(2)步制得的接种物和紫花苜蓿籽油接入培养基(2)，接种量为5～15％(v/v)，接油量为10～40微升，摇匀后于35～38℃培养20～24小时，制得发酵液；(4)共轭亚油酸的提取从第(3)步制得的发酵液中取出1ml于试管中，将异丙醇2ml加入该试管中溶解发酵液，再加入正己烷1ml于试管中，将该试管放入振荡器进行振荡，使正己烷充分萃取发酵液中的共轭亚油酸为止，再将所得混合物置于离心机中以4000转/分钟的转速离心20分钟，然后吸出上层的正己烷层并用水洗，将正己烷层收集后用旋转蒸发器于35℃旋转蒸发20分钟，即制得共轭亚油酸；在实际生产中，上述各步中所有物质的用量根据需要按比例扩大或缩小。