[发明专利]应用于组织工程的细胞三维培养方法无效
| 申请号： | 200610016042.X | 申请日： | 2006-09-28 |
| 公开（公告）号： | CN1928077A | 公开（公告）日： | 2007-03-14 |
| 发明（设计）人： | 郭勇;张西正;李瑞欣;魏严;张永红 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军军事医学科学院卫生装备研究所 |
| 主分类号： | C12N5/06 | 分类号： | C12N5/06;C12N5/08;C12N11/00 |
| 代理公司： | 天津市三利专利商标代理有限公司 | 代理人： | 闫俊芬 |
| 地址： | 300161*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种应用于组织工程的细胞三维培养方法。本发明属于组织工程领域，该方法将100－500IU/mL工作浓度的凝血酶和20－60mmol工作浓度的氯化钙等催化剂添加在各种生物支架材料中，以含10－50mg/mL工作浓度的血纤维蛋白原和10－50U/mL工作浓度的XIII因子的培养基悬浮各种细胞，利用血凝固的原理，使细胞均匀接种在各种支架材料中，获得细胞－支架材料－纤维蛋白凝胶三维培养系统。利用这种方法，可获得良好的三维培养细胞，构建出各种工程化组织。 | ||
| 搜索关键词： | 应用于 组织 工程 细胞 三维 培养 方法 | ||
【主权项】：
1.一种应用于组织工程的细胞三维培养方法，其特征是，包括下述步骤：(1)首先将100-500IU/mL工作浓度的凝血酶和20-60mmol工作浓度的氯化钙添加在支架材料中，(2)接着将10-50mg/mL工作浓度的血纤维蛋白原和10-50U/mL工作浓度的XIII因子溶解在哺乳动物细胞培养用的液体培养基中，(3)然后将1×107-2×108/mL浓度的细胞添加在上述液体培养基中并充分混匀细胞，(4)再将上述细胞悬液接种在上述步骤(1)的支架材料中，细胞悬液在5-20秒内凝固，形成细胞-支架-血纤维蛋白凝胶三维复合体，(5)37℃下放置1小时完全凝固后，添加上述液体培养基在5％二氧化碳的培养箱中培养该复合体，每1-2天换一次液体培养基，即得细胞的三维培养复合体。
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