[发明专利]注射用刺五加叶总黄酮提取物冻干粉针的质量检测方法

摘要

本发明提供了注射用刺五加叶总黄酮提取物冻干粉针的质量检测方法，它包含对注射用刺五加叶总黄酮提取物冻干粉针中的刺五加叶的薄层鉴别，总黄酮含量、金丝桃苷含量的测定，检测注射用刺五加叶总黄酮提取物冻干粉针的总黄酮和单体黄酮含量。本发明定性和定量检测了注射用刺五加叶总黄酮提取物冻干粉针的成分含量，从而为确保注射用刺五加叶总黄酮提取物冻干粉针的质量稳定、安全可靠，提供用于质量控制的更科学和更高效方法。

主权项

1.注射用刺五加叶总黄酮提取物冻干粉针的质量检测方法，其特征在于，包含以下步骤和条件：I.注射用刺五加叶总黄酮提取物冻干粉针的观察与薄层鉴别；(1)取注射用刺五加叶总黄酮提取物冻干粉针观察，内容物为黄棕色疏松固体状物；气微，味微苦；(2)注射用刺五加叶总黄酮提取物冻干粉针内容物10mg-30mg，置锥形瓶中，加60％-95％乙醇5ml，超声处理使溶解，作为供试品溶液；另取金丝桃苷对照品，加60％-95％乙醇制成每1ml含0.25-0.50mg的溶液，作为对照品溶液；再取刺五加对照药材粉末1g，加入甲醇30ml，回流1小时，滤过，滤液浓缩至干，残渣加水10ml溶解，在60℃～90℃，用石油醚提取5次，每次20ml，弃去石油醚液，水层蒸干，残渣加乙醇1ml溶解，作为对照药材溶液；照中国药典2000年版一部附录VIB的薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各3μl，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以体积比为3-5∶∶1-3∶2-4∶0.5-1的苯-甲醇-丁酮-冰醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，置波长为365nm紫外灯下检视；注射用刺五加叶总黄酮提取物冻干粉针供试品溶液色谱中，与金丝桃苷对照品及刺五加叶对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；II、注射用刺五加叶总黄酮提取物冻干粉针的含量测定(1)分光光度法测定总黄酮含量精密称取金丝桃苷对照品适量，加60％-95％乙醇制成每1ml含金丝桃苷0.25-0.5mg的溶液，即得金丝桃苷对照品溶液；精密量取金丝桃苷对照品溶液0.2ml、0.4ml、0.6ml、0.8ml、1.0ml分别置5ml量瓶中，各加60％-95％乙醇至1ml及5％亚硝酸钠0.2ml，摇匀，放置6分钟，加入10％硝酸铝溶液0.2ml，摇匀，放置6分钟，加入4％氢氧化钠溶液1.0ml，再加60％-95％乙醇至5ml，放置15分钟，以相应试剂为空白，立即照中国药典2000年版一部附录VB的分光光度法，于490nm-510nm-波长处测定吸光度；以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线；取注射用刺五加叶总黄酮提取物冻干粉针内容物约20mg-40mg，置50ml量瓶中，加60-95％乙醇溶解并稀释至50ml，摇匀，精密量取该溶液0.5ml，置5ml量瓶中，加60％-95％乙醇至1ml，加5％亚硝酸钠0.2ml，摇匀，放置6分钟，加入10％硝酸铝溶液0.2ml，摇匀，放置6分钟，加入4％氢氧化钠溶液1.0ml，再加60％-95％乙醇至5ml，放置15分钟，以60％-95％乙醇为空白，立即照中国药典2000年版一部附录VB分光光度法，于490nm-510nm-波长处测定吸光度，从标准曲线上读出注射用刺五加叶总黄酮提取物冻干粉针供试品溶液中金丝桃苷的重量，计算，即得金丝桃苷的含量；冻干粉针每支含总黄酮以金丝桃苷C21H20O12计，不得少于50mg；(2)高效液相色谱法测定金丝桃苷含量色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇和0.1％-0.5％醋酸溶液为流动相，两者体积比为30-40∶70-60，波长254-360nm；精密称取金丝桃苷对照品适量，加60％-95％乙醇制成每1ml含0.05-0.15mg金丝桃苷的溶液，即得金丝桃苷对照品溶液；取注射用刺五加叶总黄酮提取物冻干粉针内容物约25-40mg，精密称定，置50ml量瓶中，用60％-95％乙醇溶解并稀释至50ml，摇匀，即得注射用刺五加叶总黄酮提取物冻干粉针供试品溶液；分别精密吸取金丝桃苷对照品溶液和注射用刺五加叶总黄酮提取物冻干粉针供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪中，测定；冻干粉针每支含金丝桃苷(C21H20O12)不得少于5.0mg；上述步骤并不需要按照先后顺序进行。符合以上条件的注射用刺五加叶总黄酮提取物冻干粉针成品为合格品。