[发明专利]mfg12－鼠纤维介素反义质粒的构建方法及其药学用途

摘要

本发明涉及生物材料领域。具体是利用MouseFibrinogen－like protein2，mfgl2、简称mfgl2鼠纤维介素反义质粒，构建一种新的生物制剂，用于病毒诱导的重型肝炎和其它以微循环障碍损伤为主要病理生理特征疾病的治疗的药学用途。本发明基于重型肝炎暂无确定有效的治疗方法，提出了一种用于治疗病毒诱导的重型肝炎的基因药物。发明人构建了一种新的生物制剂－mfgl2鼠纤维介素反义质粒，用以抑制mfgl2凝血酶原酶的表达。

主权项

1、一种mfgl2鼠纤维反义质粒的构建方法，步骤如下：步骤一，载体的构建部分：1)PCR产生针对mfgl2凝血酶原酶基因的反义模板。产生反义序列的模板：gccgcactgc aaggatgagg cttcctggtt ggttgtggct gagttctgcc gtcctcgctg 60cctgccgagc ggtggaggag cacaacctga ctgaggggct ggaggatgcc agcgcccagg 120ctgcctgccc cgcgaggctg gagggcagcg ggaggtgcga ggggagccag tgccccttcc 180agctcaccct gcccacgctg accatccagc tcccgcggca gcttggcagc atggaggagg 240tgctcaaaga agtgcggacc ctcaaggaag cagtggacag tctgaagaaa tcctgccagg 300actgtaagtt gcaggctgac ga 322该序列mfgl2基因的部分外显子1的序列，是通过PCR从含有mfgl2凝血酶原酶的mRNA cDNA的载体pCR3.1扩增得到，部分外显子1两端引入酶切位点Xba I和EcoR I。2)将1)步骤中产生的模板插入pcDNA3.0载体构成mfgl2反义质粒。产生的反义模板可反向插入pcDNA3.0载体的酶切位点EcoRI和XbaI。