[发明专利]人纤维介素hfgl2 shRNA干扰质粒的构建方法及其药学用途

摘要

人纤维介素hfgl2 shRNA干扰质粒的构建方法及其药学用途，本发明涉及生物工程领域，具体地说是构建一种新的生物制剂：hfgl2shRNA干扰质粒，实现本发明具体技术方案是发明人构建了一种新的生物制剂－hfgl2 shRNA干扰质粒，根据hfgl2凝血酶原酶cDNA序列及设计原则筛选出靶序列，根据靶序列设计hfgl2 shRNA模板，再将模板设计于下游引物中，PCR扩增U6启动子，两端分别引入酶切位点BamH I和Hind III，将下游带有hfgl2 shRNA模板的U6启动子插入pMSCVneo载体相应酶切位点BamH I和Hind III，我们通过细胞水平实验，证实hfgl2 shRNA干扰质粒可以有效抑制hfgl2基因的表达。

主权项

1.人纤维介素hfgl2 shRNA干扰质粒的构建方法，其步骤如下：根据hfgl2凝血酶原酶cDNA序列及设计原则筛选出靶序列，根据靶序列设计hfgl2 shRNA模板，再将模板设计于下游引物中，PCR扩增U6启动子，两端分别引入酶切位点BamH I和Hind III，将下游带有hfgl2 shRNA模板的U6启动子插入pMSCVneo载体相应酶切位点BamH I和Hind III，产生hfgl2凝血酶原酶的shRNA的dsDNA模板序列为：序列1：5’-AGAGGAGATCAATGTACTT TTCAAGAGAAAGTACATTGATCTCCTCTTTTTT-3’序列2：5’-ATACAGAGGTGTCCGTAAT TTCAAGAGAATTACGGACACCTCTGTATATTTTT-3’