[发明专利]一种快速方便转基因插入位点鉴定技术无效
| 申请号： | 200610023132.1 | 申请日： | 2006-01-06 |
| 公开（公告）号： | CN1995384A | 公开（公告）日： | 2007-07-11 |
| 发明（设计）人： | 王铸钢 | 申请（专利权）人： | 王铸钢 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12N15/63 |
| 代理公司： | 上海专利商标事务所有限公司 | 代理人： | 徐迅 |
| 地址： | 200023上海*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种确定转基因插入位点的方法，其特点为通过限制性内切酶消化，接头连接和PCR等简单易行的步骤获得位于载体与接头之间的基因组DNA序列而确定转基因插入位点。本发明的方法可用于确定外源基因整合位点及附近的基因组序列以及进行转基因表达与表型的因果关系分析等。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 快速 方便 转基因 插入 鉴定 技术 | ||
【主权项】：
1.一种确定转基因插入位点的方法，其特征在于，包括步骤：(a)对于待确定转基因插入位点的基因组DNA，用限制性内切酶进行消化，从而获得消化后的基因组片段，然后在消化后的基因组片段两端连接接头，从而形成在两端带有接头的基因组片段；(b)以载体序列特异性引物和接头序列特异性引物，对步骤(a)中两端带有接头的基因组片段进行PCR扩增，从而获得PCR产物，其中所述的PCR产物对应于位于载体与接头之间的基因组DNA序列；(c)对步骤(b)中的PCR产物进行测序；(d)根据步骤(c)的测序结果，确定转基因的插入位点。
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