[发明专利]基因工程重组牛白细胞介素－2的复性方法

摘要

本发明提供重组牛白介素－2的脲浓度梯度复性方法及用于该方法的试剂盒。利用该复性方法，复性液中重组牛白介素－2的复性率可达50％以上，活性测定效价可达9.6×10⁴IU/mL。

主权项

1.一种重组牛白介素2的复性方法，该方法包括：a)将重组牛白介素2的包涵体经变性后在基本上由30-100mmol/L Tris-HCl、3.5-4.5mol/L尿素、0.5-1mol/L盐酸胍、0.3-0.7mol/L L-Arg、1∶3-3∶1比例的GSH和GSSG组成、pH 8-10的复性液中透析，透析温度为0-10℃，透析2-8小时以获得透析产物；b)将步骤a)中的透析产物转入基本上由30-100mmol/L Tris-HCl、2.8-3.3mol/L尿素、0.5-1mol/L盐酸胍、0.3-0.7mol/L L-Arg、1∶3-3∶1比例的GSH和GSSG组成、pH 8-10的复性液中透析，透析温度为0-10℃，透析2-8小时，以获得透析产物；c)将步骤b)中的透析产物转入基本上由30-100mmol/L Tris-HCl、1.5-2.5mol/L尿素、0.5-1mol/L盐酸胍、0.3-0.7mol/L L-Arg、1∶3-3∶1比例的GSH和GSSG组成、pH 8-10的复性液中透析，透析温度为0-10℃，透析2-8小时，透析产物离心后获得重组牛白介素2的复性产物；其中，步骤a)和步骤b)、步骤b)和步骤c)中所用的尿素浓度之差分别为0.5-1.5mol/L。