[发明专利]对微量蛋白或多肽溶液同步富集、脱盐并进行鉴定的方法无效
| 申请号： | 200610025276.0 | 申请日： | 2006-03-30 |
| 公开（公告）号： | CN1821777A | 公开（公告）日： | 2006-08-23 |
| 发明（设计）人： | 于锡娟;张亚红;王晓燕;唐颐;杨芃原 | 申请（专利权）人： | 复旦大学 |
| 主分类号： | G01N30/08 | 分类号： | G01N30/08;G01N30/72;B01J20/281 |
| 代理公司： | 上海正旦专利代理有限公司 | 代理人： | 陆飞;盛志范 |
| 地址： | 20043*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明属生化分析鉴定技术领域，具体为一种对微量蛋白或多肽溶液同步富集、脱盐并直接进行鉴定的方法。该方法以氧化硅纳米粒子作为吸附剂，对蛋白质以及蛋白质酶解多肽进行高效吸附，并能克服高浓度盐的干扰。由于氧化硅纳米粒子与MALDI－MS有很好的相容性，被吸附的样品无需洗脱步骤可直接进行MALDI－TOF/MS分析，操作简单，避免了洗脱过程带来的样品损失。本发明可克服4M氯化钠或8M尿素对质谱的干扰，对蛋白的富集效率可达100倍。 | ||
| 搜索关键词： | 微量 蛋白 多肽 溶液 同步 富集 脱盐 进行 鉴定 方法 | ||
【主权项】：
1、一种微量蛋白或多肽同步富集、脱盐并进行鉴定的方法，其特征是具体步骤如下：(1)以氧化硅纳米粒子作为纳米吸附剂，加入多肽或蛋白质样品的水溶液或盐溶液中，通过静电吸附、亲/疏水作用富集样品，样品浓度为10-11M-10-6M之间，富集时间5-180分钟之间，富集温度4-90℃，氧化硅纳米粒子用量为0.02-2000微克之间；(2)对经步骤(1)的溶液进行离心处理，弃除上清液，收集下层氧化硅沉淀，再用50％的乙腈稀释；(3)上述被富集的样品，直接与有机基质均匀混合，形成均匀细致的结晶，进行MALDI/MS分析；(4)根据质谱结果，鉴定多肽或蛋白质。
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