[发明专利]一种基因工程菌、制备及其用途无效
申请号: | 200610027929.9 | 申请日: | 2006-06-21 |
公开(公告)号: | CN101054569A | 公开(公告)日: | 2007-10-17 |
发明(设计)人: | 马明浩;吴自荣;黄静;胡荣章;叶海峰;金丽 | 申请(专利权)人: | 华东师范大学 |
主分类号: | C12N1/21 | 分类号: | C12N1/21;C12N15/70;C12N15/66;C12P21/02;C12N15/62;C07K19/00;C12N9/00;C12N15/52 |
代理公司: | 上海德昭知识产权代理有限公司 | 代理人: | 程宗德 |
地址: | 200062*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明涉及一种基因工程菌,以及该基因工程菌的制备方法及其用途,属于生物工程技术领域。该基因工程菌由重组质粒和宿主菌构成,其中宿主菌指的是大肠杆菌DH5α、BL21(DE3)或Rosetta-gami(DE3)中的任意一种,重组质粒指的是含GAD65基因的质粒pET32a(+)。该基因工程菌的构建方法包括设计Nest-PCR上游和下游引物,用PCR从人胰腺cDNA库中扩增人GAD65基因片断,并通过表达载体转化到大肠杆菌获得高效表达重组人GAD65的基因工程菌。本发明提供的基因工程菌的用途为用于生产可溶的具有活性的硫氧还蛋白-人谷氨酸脱羧酶65融合蛋白,以及具有活性的重组人GAD65。具有表达量高、成本低,表达获得的重组人谷氨酸脱羧酶融合蛋白直接就有酶学活性和免疫学活性,纯化步骤简便,易于操作,得率高等显著效果。 | ||
搜索关键词: | 一种 基因工程 制备 及其 用途 | ||
【主权项】:
1.一种基因工程菌,由重组质粒和宿主菌构成,其特征在于重组质粒指的是含GAD65基因的质粒pET-32a(+),宿主菌指的是大肠杆菌DH5α、BL21(DE3)或Rosetta-gami(DE3)中的任意一种。
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