[发明专利]对微量蛋白质或多肽同步富集、脱盐并直接进行分析的方法无效
| 申请号： | 200610028369.9 | 申请日： | 2006-06-29 |
| 公开（公告）号： | CN1873407A | 公开（公告）日： | 2006-12-06 |
| 发明（设计）人： | 于锡娟;张亚红;王晓燕;唐颐;杨芃原 | 申请（专利权）人： | 复旦大学 |
| 主分类号： | G01N30/02 | 分类号： | G01N30/02;G01N30/08;G01N1/34 |
| 代理公司： | 上海正旦专利代理有限公司 | 代理人： | 陆飞;盛志范 |
| 地址： | 20043*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明属生化分析鉴定技术领域，具体是一种以氧化硅纳米粒子作为吸附剂，对痕量蛋白质以及蛋白质酶解样品脱盐富集并直接进行基质辅助激光解吸离子化/质谱(MALDI/MS)分析的方法。氧化硅纳米粒子能克服高浓度盐的干扰，对蛋白质以及蛋白质酶解多肽有很好的吸附效果。与传统耙上洗涤脱盐以及商业ZipTipTM脱盐比较，纳米材料脱盐效果最好。而且由于氧化硅纳米粒子与MALDI－MS有很好的相容性，被氧化硅纳米粒子吸附的样品无需样品洗脱步骤可直接进行MALDI－TOF/MS分析，操作简单，避免了洗脱过程带来的样品损失。本发明对浓度为10－10M的蛋白质酶解含盐样品进行鉴定，也可克服4M氯化钠或8M尿素对质谱的干扰，对蛋白质的富集效率可达100倍。 | ||
| 搜索关键词： | 微量 蛋白质 多肽 同步 富集 脱盐 直接 进行 分析 方法 | ||
【主权项】：
1、一种微量蛋白质或多肽同步富集脱盐并直接进行分析的方法，其特征是利用氧化硅纳米粒子极强的抗盐能力和对多肽或蛋白质样品良好的吸附能力，以及纳米尺寸的粒径与有机基质极好的相容性，对痕量蛋白质或蛋白质酶解肽段进行富集、脱盐后，无需洗脱步骤直接完成MALDI/MS的分析检测，其具体步骤如下：(1)以氧化硅纳米粒子作为纳米吸附剂，加入多肽或蛋白质样品的水溶液或盐溶液中，通过静电吸附、亲/疏水作用富集样品并脱盐；样品浓度是10-11M-10-6M，富集时间5-60分钟，富集温度4-60摄氏度，氧化硅纳米粒子用量是样品重量的1％-10％；(2)被富集的样品直接与基质均匀混合，形成均匀细致的结晶，进行MALDI/MS分析；(3)根据质谱结果，鉴定多肽或蛋白质。
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