[发明专利]一种同步扩增检测肝炎及艾滋病毒核酸的方法及试剂盒

摘要

本发明属诊断试剂核酸诊断技术领域，具体为一种同步提取并同步扩增均相检测肝炎和艾滋病毒核酸的方法和试剂盒。该方法包括以磁珠作为自动化介质，特异性同步捕获HBV、CHV、HIV核酸的方法。RNA外标和RNA内标快速加端生物素引物的PCR构建和纯化，实时同步多项检测的基于Tagman探针的T－PCR扩增法等。相应的试剂盒包括去抑制剂、裂解液、磁珠悬液、洗涤液、洗脱液、内对照、RT－PCR反应液、酶混合物、荧光探针、阳性对照、阴性对照。本发明的的特点是：单管操作，封闭性检测，自动化程度高，多种病毒核酸同步提取，同步实时检测；灵敏度高，特异性好，精密度高；适用于大规模血液筛查和大容量的临床检测。

主权项

1、一种同步扩增检测肝炎及艾滋病毒核酸的方法，其特征在于包括：基于杂交原理，选用磁珠作为自动化介质，采用磁珠分离仪进行特异性同步捕获HIV、HBV和HCV病毒核酸的方法，其中，选用与后续扩增检测中一条引物序列相一致的生物素修饰的寡核苷酸作为核酸提取试剂的捕获探针；或者，设计一段中间探针，与后续的荧光PCR体系中的一条引物序列相一致的无修饰的寡核苷酸，在其3’端连接一串Oligo(dA)18-25，作为中间杂交的主干探针，使用生物素修饰的Oligo(dT)25作为通用杂交捕获探针；或者，合成一条包含上述HBV、HCV、HIV特异探针序列的线形排列的寡核苷酸，作为一条三联共同探针，其中间间隔连接3-8个T或A，生物素的修饰仍位于共同探针的5’端。