[发明专利]人羊膜间充质干细胞的分离及培养方法及医用组合物有效
| 申请号： | 200610033007.9 | 申请日： | 2006-01-13 |
| 公开（公告）号： | CN1810959A | 公开（公告）日： | 2006-08-02 |
| 发明（设计）人： | 胡祥;杨波 | 申请（专利权）人： | 深圳市北科生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/08 | 分类号： | C12N5/08;A61K35/50 |
| 代理公司： | 深圳市中知专利商标代理有限公司 | 代理人： | 宋湘红 |
| 地址： | 518057广东省深圳市南山*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明为一种人羊膜间充质干细胞的分离及培养方法及医用组合物，分离及培养方法是将人羊膜用胰蛋白酶、胶原酶、脱氧核糖核酸酶相继消化，然后过滤制成单细胞悬液，再采用加有体积百分含量为10％－20％的胎牛血清和终浓度为10－20ng/ml的碱性成纤维生长因子的VDMEM∶VF12＝1∶1的DMEM/F12培养基，置于37℃、饱和湿度、体积分数为5％的CO2培养箱中进行培养，通过换液和传代，使人羊膜间充质干细胞逐渐得到扩增和纯化。本发明方法具有来源广泛，不受伦理限制等优越性，具有广阔的应用前景，本发明的医用组合物可用于神经替代治疗、用于心肌梗塞的治疗、用于糖尿病的治疗、用于骨组织工程、应用于整形外科等。 | ||
| 搜索关键词： | 羊膜 间充质 干细胞 分离 培养 方法 医用 组合 | ||
【主权项】：
1.一种人羊膜间充质干细胞的分离及培养方法，其特征在于包括如下顺序的步骤：(1)取人羊膜先用胰蛋白酶消化，然后用胶原酶、脱氧核糖核酸酶消化，得到细胞悬液；(2)将上一步所得的细胞悬液过滤，制成单细胞悬液；(3)将第(2)步所得细胞接种于培养基中，置于37℃、饱和湿度、体积分数为5％的CO2培养箱中进行培养，并通过换液和传代，使人羊膜间充质干细胞逐渐得到扩增和纯化，所述培养基采用VDMEM∶VF12＝1∶1的DMEM/F12培养基，其中含有体积百分含量为10％-20％的胎牛血清和终浓度为10-20ng/ml的碱性成纤维生长因子。
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