[发明专利]环介导等温扩增技术的大肠杆菌0157基因快速诊断试剂盒

摘要

环介导等温扩增技术的大肠杆菌0157基因快速诊断试剂盒，涉及生物检测试剂领域。试剂盒由(1)二对引物；(2)DNA聚合酶；(3)反应液；(4)样品预处理液；(5)荧光染料；(6)阳性对照液组成，以上六种液体分别置于容器中，其中所说的(1)引物有四套。试剂盒的优点：不需要特殊试剂与设备；高特异性：阳性率可达大于99.9％假阳性率小于0.1％；灵敏度高；鉴定简便：通过肉眼观察鉴定；用途广：可广泛用于食品、药品、化妆品、及其它们的原辅料质量控制的安全快速检测。

主权项

1、一种环介导等温扩增技术的大肠杆菌0157基因快速诊断试剂盒，其特征在于：由(1)二对引物；(2)DNA聚合酶；(3)反应液；(4)样品预处理液；(5)荧光染料；(6)阳性对照液组成，以上六种液体分别置于容器中，其中所说的(1)引物有六套，S代表G/C R代表G/A按各50％合一、外引物1：TTACTACAGGTGAAGGTGG 外引物2：GTGATATAAAATSATCAGCTTGTTC 内引物1：CAGCTAATCCTTGGCCTTTAAAATGTTTTAATGGTTGTCACGAATGAC 内引物2：ACATAGGCAATATTGGCATGACGTTTTAACTGGGCTAATCCTATAGCA或二、外引物1：GGTGGAATGGTTGTCACG 外引物2：AGCRATTTCACGTTTTCGT 内引物1：CCTATGTACAGCTAATCCTTGGCTTTTAATGACAAAACACTTTATGACCG 内引物2：ATTGGCATGACGTTATAGGCTACTTTTGCTTGTTCTAACTGGGCTAA或三、外引物1：GTAGATTCGCTGAATGTCATT 外引物2：TGTTAACAAATCCTGTCACAT 内引物1：TCAATCATCAGTAAAGACGTACCTCTTTTCGCTCTGCAATAGGTACTC 内引物2：CAGGGGATAATTTGTTTGCAGTTGATTTTCGTTCAACAATAAGCCGTAGA或四、外引物1：TGCAGGGATCAGTCGTAC 外引物2：AGATCATCCAGTGTTGTACG 内引物1：GTCAGTGAGGTTCCACTATGCGTTTTAATCGCCATTCGTTGACTAC 内引物2：TCTGTGGCAAGAGCGATGTTTTTTCCCTCTGTATTTGCCGAA或五外引物1：-CTTCGTTAAATAGTATACGGACA 外引物2：GGCCACATATAAATTATTTTGCT 内引物1：GTGTGGTTAATAACAGACACCGATGTTTTGAGATATCGACCCCTCTTG 内引物2：GGCAGTTATTTTGCTGTGGATATACTTTTATAATCAGACGAAGATGGTCAA或六外引物1：TGCAAATCAGTCGTCACT 外引物2：CATCGTATACACAGGAGCA 内引物1：TCTGGATGCATCTCTGGTCATTTTTCACTGGTTTCATCATATCTGG 内引物2：AGTTCTGCGTTTTGTCACTGTTTTTTGCCTGACGAAATTCTCTC(2)DNA聚合酶为Bst DNA polymerase(Large Fragment)；(3)反应液为80μl 10mM dNTP，50μl 10×ThermoPol Buffer，20μl 150mMMgSO4组成；(4)样品预处理液为20mM Tris-HCl[pH8.0]，2mM EDTA，1.2％TritonX-100；(6)阳性对照液为大肠杆菌0157基因组DNA。