[发明专利]柠檬酸提取梨花粉原生质体的方法

摘要

本发明梨花粉和花粉管原生质体的提取方法，涉及植物体细胞壁的破除和原生质体获取的方法，是属于生物化学及食品科学领域；本发明主要是依据植物花粉细胞壁的特性来获取完整的花粉或花粉管原生质体，而且保持原有的活力。利用柠檬酸去除花粉壁的方法，该方法是将干燥的花粉放入2－3mol/L柠檬酸液中，经过约30分钟左右的培养，可看到花粉的原生质体逐渐从萌芽口处出来，通过离心能够获得脱壁的花粉原生质体，该方法获得了原生质，能够保持原有的营养价值，没有污染，方法简单，成本低，非常适合于在食品科学领域的应用。

主权项

1、柠檬酸提取梨花粉原生质体的方法，包括下列步骤：1)花粉的采集：采集当天开放的花粉，然后让花粉充分干燥；2)柠檬酸液的制备：2-3mol/L的柠檬酸，加入5～10mmol/L的α-磺基甲脂磺酸钠溶液和0.01～0.02mmol/L的牛血清蛋白；3)花粉破壁：取充分干燥的花粉放入配制好的柠檬酸液中，置于摇床中花粉破壁处理，温度为30-37℃，100-120rpm，30min后，就可见花粉的原生质体逐渐从萌芽口处出来，从而获得破壁的花粉原生质；4)离心：破壁后的花粉先进行高速离心5000rpm以上，5-10min，取沉淀物；沉淀物放入蒸馏水中，进行低速成离心500rpm以下，3min用以去除花粉外壳，上清即为所需的花粉原生质体。