[发明专利]菊苣试管苗的高效快繁方法

摘要

本发明公开了一种菊苣组培苗的快繁方法。其技术特征是以菊苣叶片为外植体，包括如下步骤：(1)无菌实生苗的产生；(2)离体叶片不定芽的直接发生；(3)不定芽的生根、练苗与移栽。本发明以菊苣无菌苗叶片切块为外植体，培养15～20d，每个外植体上可直接形成20～40个不定芽，35～40d内可再生30多个健壮的组培苗，一棵具5片叶的无菌实生苗，离体培养30天后可产生500棵左右的优质组培苗。与常规的离体植株再生体系相比，培养周期至少缩短25～30d，培养成本减少一半以上，繁殖系数增加3～5倍。

主权项

1、一种菊苣组培高效快繁方法，以菊苣叶片为外植体，包括如下步骤：(1)无菌实生苗的产生菊苣种子经灭菌接种于无激素的1/2MS基本培养基MS1上萌发成无菌实生苗；(2)离体叶片不定芽的直接发生将20～50d龄的无菌实生苗叶片切块，接种在不定芽直接诱导培养基MS2上产生绿色的不定芽芽点，继续培养15～20d，芽点可发育成单生和/或簇生的不定芽；(3)不定芽的生根切取不定芽转入MS或1/2MS生根培养基上诱导生根；上述步骤中培养基组分及含量配比如下：无菌实生苗培养基MS1：1/2MS培养基蔗糖 30g/L琼脂 6.5g/LpH值 5.8～6.2不定芽直接诱导诱导培养基MS2：MS培养基6-BA 0.5～2.0mg/LNAA 0.2～1.0mg/LAgNO3 2～10mg/LVB1 50～100mg/L脯氨酸 200～300mg/L蔗糖 30～60g/L琼脂 6.5g/LpH值 5.8～6.2生根培养基MS3：MS或1/2MS培养基IBA 0.2～1.0mg/L蔗糖 20g/L琼脂 6.5g/LpH值 5.8～6.2。