[发明专利]一种从蛇毒中提取单一成分降纤酶的方法无效
| 申请号： | 200610042043.1 | 申请日： | 2006-01-18 |
| 公开（公告）号： | CN1807613A | 公开（公告）日： | 2006-07-26 |
| 发明（设计）人： | 王晶翼;刘禄娟;张润平;张明会;于萍 | 申请（专利权）人： | 齐鲁制药有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/68 | 分类号： | C12N9/68 |
| 代理公司： | 济南金迪知识产权代理有限公司 | 代理人： | 郭群杰 |
| 地址： | 250100山东*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 一种从蛇毒中提取具有降纤溶栓作用的降纤酶的方法，属于医药技术领域。步骤包括如下：蛇毒经浸泡溶解、离心；上清液经亲和柱层析；洗脱液直接流经葡聚糖凝胶G25脱盐层析；含有效成分的洗脱液经包埋、浓缩；浓缩样品再经分子筛层析，即可得到单一成分的降纤酶。本方法具有适合规模化生产、操作简便、生产周期短、产品纯度高等特点。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 蛇毒 提取 单一 成分 降纤酶 方法 | ||
【主权项】：
1、从蛇毒中提取单一成份降纤酶的方法，步骤包括：(1)蛇毒用缓冲液浸泡、溶解过夜，离心去除沉淀，得上清液；(2)蛇毒上清液经亲和柱层析，上样结束后，用pH8.5～9.5含2.0～2.5M NaCL的Tris-HCL缓冲液I进行洗脱，至核酸蛋白检测仪读数达到基线后，再用pH8.5～9.5含0.1～0.5M NaCL和0.1～0.2M苯甲脒盐酸盐的Tris-HCL缓冲液II洗脱，核酸蛋白检测仪检测样品峰，收集得降纤酶粗提液；(3)降纤酶粗提液直接流经脱盐柱，去除苯甲脒盐酸盐；(4)去除苯甲脒酸盐的降纤酶粗提液用聚乙二醇20000包埋、浓缩，得降纤酶粗提液的浓缩液；(5)降纤酶粗提液的浓缩液经分子筛柱层析，即得单一组份降纤酶；上述提取分离的全过程均在3～6℃的低温层析冷柜或冷室中进行。
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