[发明专利]逆转录病毒包装细胞系和肝细胞靶向性导入方法有效
申请号: | 200610044680.2 | 申请日: | 2006-06-12 |
公开(公告)号: | CN1884496A | 公开(公告)日: | 2006-12-27 |
发明(设计)人: | 鲁艳芹;韩金祥;王传玺;戚鹏;栾中华 | 申请(专利权)人: | 山东省医药生物技术研究中心 |
主分类号: | C12N5/10 | 分类号: | C12N5/10;C12N15/867;C12N15/85 |
代理公司: | 济南金迪知识产权代理有限公司 | 代理人: | 鲍光明 |
地址: | 250062山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明涉及一种逆转录病毒包装细胞系和肝细胞靶向性导入方法。该方法是组建新的逆转录病毒包装细胞系,该细胞系能表达病毒包装所必备的GAG-POL,以及ENV-PHSA-R融合蛋白,同时,env上对病毒感染起关键作用的基因被定点突变。由于肝细胞表面存在PHSA-R,逆转录病毒可通过PHSA介导,借助肝细胞表面的相应受体特异性地感染肝细胞,实现基因定向转移,使基因能够被特异运送至靶器官和靶细胞。因此,通过肝细胞靶向性系统可能成为肝炎基因治疗中确实有效的方法之一。 | ||
搜索关键词: | 逆转录 病毒 包装 细胞系 肝细胞 靶向 导入 方法 | ||
【主权项】:
1.一种逆转录病毒的包装细胞系,含有Mo MLV和HBV的gag-pol、env-pres2基因的载体,其中env基因为嵌合基因,它含有pit1和pit2受体,可与靶细胞表面的pit1和pit2结合且相互影响,介导逆转录病毒感染靶细胞,其中逆转录病毒表面糖蛋白的第60位Tyr和第61位Val氨基酸残基对受体的识别起着决定性的作用,在其基因序列中引入限制性内切酶位点Sal I使其定点突变,将上述两个质粒共转染NIH3T3细胞,加压筛选得到稳定转染细胞系,将逆转录载体转染此细胞系后,可以包装出逆转录病毒,此病毒能够特异性地感染肝细胞。
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