[发明专利]一种分离纯化组蛋白H4的方法无效
| 申请号： | 200610047932.7 | 申请日： | 2006-09-29 |
| 公开（公告）号： | CN101153050A | 公开（公告）日： | 2008-04-02 |
| 发明（设计）人： | 李鹏程;李翠萍;于华华;刘松;邢荣娥;郭占勇;陈晓琳;冯金华 | 申请（专利权）人： | 中国科学院海洋研究所 |
| 主分类号： | C07K1/14 | 分类号： | C07K1/14;C07K14/435 |
| 代理公司： | 沈阳科苑专利商标代理有限公司 | 代理人： | 许宗富;周秀梅 |
| 地址： | 26607*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明涉及海洋生物技术领域，具体的说是一种分离纯化组蛋白H4的方法。其分离纯化步骤为：将样品海蜇破碎，加入磷酸缓冲溶液，2－6℃浸泡0.5－48h；而后离心取上清液；用阴离子交换层析对上清液进行分离，得到组蛋白H4。测其分子量约为11kDa，N－末端氨基酸序列为DN/KIQGITKPA。采用本发明的分离纯化方法，为获得组蛋白提供了新的方法。本发明交换剂流速快，载量高可用于大量粗产品的快速纯化，缩短了分离时间；并且分离纯化的实验步骤少，直接将提取的粗产品过层析柱，减少了组蛋白的损失及活性的丢失。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 分离 纯化 组蛋白 h4 方法 | ||
【主权项】：
1.一种分离纯化组蛋白H4的方法，其特征在于包括以下步骤：(1)提取样品：将50g-150g的海蜇样品破碎，然后加入样品重量0.5-4倍的缓冲液，放入2℃-6℃下，浸泡0.5-48hh；而后将其在相对离心力为9160-29700g下离心10-30min，取上清液备用；(2)分离纯化：①加样前样品预处理：将步骤1)得到的样品在2℃-6℃下加入到离子交换剂中，每隔8-12min搅拌一次，共搅拌2-6次，而后在相对离心力为573-1467g下，离心5-10min，弃去上清液；②将已吸附蛋白的离子交换剂注入到层析柱中，用3-5倍床体积的缓冲液淋洗；③洗脱：采用含有NaCl的缓冲液，以60-90ml/h的洗脱速度进行阶段性洗脱，收集组分。
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