[发明专利]一种A、C群脑膜炎球菌多糖结合物中游离多糖含量的测定方法

摘要

本发明一种A、C群脑膜炎球菌多糖结合物中游离多糖含量的测定方法，属于生物技术领域，其步骤为：取A、C群脑膜炎球菌多糖结合物作为样1；取A、C脑膜炎球菌多糖结合物对应的衍生物溶液为样3；取一定量A、C群脑膜炎球菌多糖结合物，加入冷酚溶液，充分振荡，离心收集上清液为样2；取一定量A、C脑膜炎球菌多糖结合物对应的衍生物溶液，加入冷酚溶液，充分振荡，离心收集上清液为样4。A群脑膜炎球菌多糖结合物测定磷含量、C群脑膜炎球菌多糖结合物测定唾液酸含量，计算出样1、样2、样3、样4的多糖浓度，并利用公式计算游离多糖含量。本发明能准确、快速、简便测定出结合物中游离多糖的含量，从而评价制品质量。

主权项

1、一种A、C群脑膜炎球菌多糖结合物中游离多糖含量的测定方法，其步骤是：(1)取待检脑膜炎球菌多糖结合物2ml作为样1，取该待检脑膜炎球菌多糖结合物对应的衍生物溶液2ml作为样3；(2)另取该脑膜炎球菌多糖结合物2ml置于15ml离心管中，取该待检脑膜炎球菌多糖结合物对应的衍生物溶液2ml置于另一15ml离心管中；向每离心管加入2～10ml冷酚溶液，振荡混匀10～30分钟，置冰浴5～20分钟，5000～10000rpm离心10～30分钟，每离心管单独收集上清液，结合物上清液为样2，衍生物上清液为样4；(3)A群脑膜炎球菌多糖结合物测定磷含量，计算样1、样2、样3、样4的多糖浓度；C群脑膜炎球菌多糖结合物测定唾液酸含量，计算样1、样2、样3、样4的多糖浓度；样1、样2、样3、样4的多糖浓度分别为p1、p2、p3、p4；(4)根据公式计算回收率P：$P=\frac{p4}{p3}\times 100\%$ ，回收率应在80～120％；(5)根据公式计算游离多糖含量H：$H=\frac{p2}{p1}÷P\times 100\%$ ，式中P为回收率。