[发明专利]金丝吊葫芦的人工快速繁殖方法

摘要

本发明涉及一种金丝吊葫芦的人工快速繁殖方法，具体步骤如下：1)外植体预处理：2)外植体灭菌：3)接种：4)诱导培养：5)愈伤组织分化培养：6)增殖培养：7)壮苗培养：8)生根培养：9)炼苗与移栽：10)移栽苗床管理：11)组培苗假植：12)剪取插穗：13)插穗药剂处理：14)扦插：15)扦插苗床管理。本发明有益的效果是：利用植物组织培养技术优势，在短期内、在试管内快速大量繁殖金丝吊葫芦组培苗，月增殖率达3～5倍，年组培苗生产能力培养室面积每平方米达1万苗以上，解决了金丝吊葫芦的资源不足的问题。提出的人工快繁方法采用外植体材料少，可有效地挽救珍稀濒危植物，可实行规模化生产，为金丝吊葫芦的产品深度系列开发提供种苗基础。

主权项

1、一种金丝吊葫芦的人工快速繁殖方法，其特征在于：1)外植体预处理：剪取10～15cm长的藤条，用加有体积比为1％洗洁精的自来水中漂洗后，用自来水冲洗20～40min；2)外植体灭菌：将预处理好的材料进行材料灭菌，先用体积比为75％的酒精浸泡0.5～1.0min，用无菌水冲洗1次，再用重量比为0.1％升汞溶液或用体积比为2％的次氯酸钠水溶液灭菌10～15min，最后用无菌水冲洗3～5次；3)接种：将灭菌过的材料放在灭菌过的滤纸上吸干水分，切取约0.5～1.0cm长的顶芽和带腋芽的茎段，接种在诱导培养基中；4)诱导培养：诱导培养直至诱导出顶芽和腋芽，茎段基部有愈伤组织发生，继续诱导培养直至在茎段基部愈伤组织处分化出丛生芽；5)愈伤组织分化培养：将茎段基部诱导的愈伤组织，切成0.5cm×0.5cm大小的切块，接种于愈伤组织分化培养基中；培养条件是：温度25±2℃、光照10～12h/d、光照强度为1500～2000lx；培养直至愈伤组织增大并且在愈伤组织表面分化出丛生芽；6)增殖培养：将长有丛生芽的愈伤组织，切成上部茎、带有下部茎的愈伤组织，切去底部愈伤组织后，切成0.5～1.0cm大小的小块接种于增殖培养基中；培养直至在芽的基部诱导出愈伤组织，随后在芽的基部愈伤组织表面不断分化出丛生芽，继续培养直至幼芽伸长，叶片展开，其月增殖率达3～5倍；7)壮苗培养：2cm以上的上部茎接种于壮苗培养基中进行壮苗培养；8)生根培养：3cm以上的上部茎或经过壮苗培养后的组培苗接种于生根培养基中进行生根培养，生根培养直至在组培苗的基部诱导出根；9)炼苗与移栽：当生根培养30天左右时，将培养瓶先从恒温培养室搬入移栽温室进行炼苗后，取出试管苗放在温水中洗去琼脂，然后移栽在装有泥炭∶珍珠岩∶蛭石的体积比为3∶1∶1基质的苗床或穴盘中，最后浇一次透水；10)移栽苗床管理：苗床的环境参数通过智能植物，感知环境的湿度、温度、光照、二氧化碳、基质湿度、营养液EC值，通过计算机控制苗床设施进行喷雾、加温、补光、增气、增液；11)组培苗假植：将苗床或穴盘中的组培苗假植到营养钵中，浇一次透水，之后根据营养钵中基质的干湿情况，进行浇水，同时结合浇水，每隔一个星期浇施一次2000倍稀薄无土栽培营养液；12)剪取插穗：剪取一叶一芽的茎段，剪好的插穗不能风干，要及时进入下一步处理或喷水保持湿润；13)插穗药剂处理：配制700倍的多菌灵和50mg/L的ABT生根粉的混合水溶液；或700倍的多菌灵和500mg/L的吲哚丁酸的混合水溶液；将插穗在上述溶液中浸泡15秒～60分钟；14)扦插：插穗插入装入泥炭∶珍珠岩∶蛭石的体积比为3∶1∶1基质的苗床或穴盘中；苗床每平方米可插1000～1500株，以叶片不相互重叠为宜；15)扦插苗床管理：苗床的环境参数通过智能植物，感知环境的湿度、温度、光照、二氧化碳、基质湿度、营养液EC值，通过计算机控制苗床设施进行喷雾、加温、补光、增气、增液。