[发明专利]球虫卵囊的分离纯化及子孢子制备方法无效

专利信息
申请号: 200610050193.7 申请日: 2006-04-04
公开(公告)号: CN1837349A 公开(公告)日: 2006-09-27
发明(设计)人: 杜爱芳;高翔 申请(专利权)人: 浙江大学
主分类号: C12N1/10 分类号: C12N1/10
代理公司: 杭州求是专利事务所有限公司 代理人: 张法高;赵杭丽
地址: 310027浙*** 国省代码: 浙江;33
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摘要: 一种球虫卵囊分离、纯化及子孢子制备方法,经常规处理鸡盲肠、内容物或粪便,获得卵囊的粗分离物,加2.5%重铬酸钾,放入培养箱孢子化培养2~4天,取孢子化卵囊储备悬液,离心洗涤,除去重铬酸钾,加入30%NaClO溶液,离心,取上清中白色漂浮物,加入蒸馏水混匀,离心弃上清,再用蒸馏水离心洗涤沉淀,除去NaClO和其它的有机物质,保留沉淀物,将纯化处理后的孢子化卵囊沉淀物用生理盐水悬浮后移入组织匀浆器内,研磨15-20分钟,显微镜镜检90%以上子孢子囊破碎即可。本发明方法设计合理,与传统分离制备方法相比,具有(1)操作简便、快捷,(2)提取的卵囊纯度高、杂质少;(3)子孢子活性高等优点。
搜索关键词: 虫卵 分离 纯化 孢子 制备 方法
【主权项】:
1.一种球虫卵囊分离、纯化及子孢子制备方法,其特征是:通过以下步骤实现:(1)卵囊的分离:取鸡盲肠、内容物或粪便,经常规处理,获得卵囊的粗分离物;(2)卵囊的孢子化:取卵囊粗分离物,按1∶10比例加入2.5%重铬酸钾溶液搅拌均匀,放入培养箱培养,孢子化2~4天,4℃保存备用;(3)孢子化卵囊的纯化:取孢子化卵囊储备悬液,离心洗涤,除去重铬酸钾,加入30%NaClO溶液,离心,取上清中白色漂浮物,加入蒸溜水混匀,离心弃上清,再用蒸馏水离心洗涤沉淀,除去NaClO和其它的有机物质,保留沉淀物;(4)子孢子悬液的制备:将纯化处理后的孢子化卵囊沉淀物用生理盐水悬浮后移入组织匀浆器内,研磨15-20分钟,显微镜镜检90%以上孢子囊破碎即可。
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