[发明专利]单抗ZUB1免疫磁珠分选原代人骨髓间充质干细胞的方法有效

专利信息
申请号: 200610050760.9 申请日: 2006-05-12
公开(公告)号: CN1865437A 公开(公告)日: 2006-11-22
发明(设计)人: 黄河;来晓瑜;沈建根 申请(专利权)人: 浙江大学
主分类号: C12N5/08 分类号: C12N5/08
代理公司: 杭州求是专利事务所有限公司 代理人: 张法高;赵杭丽
地址: 310027浙*** 国省代码: 浙江;33
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摘要: 发明提供一种单抗ZUB1免疫磁珠分选原代人骨髓间充质干细胞的方法,是从骨髓悬液中分离得到单个核细胞,用单克隆抗体ZUB1为标记,通过间接免疫磁珠分选系统正向分选获得ZUB1抗原阳性的人骨髓间充质干细胞。本发明方法获得的人骨髓间充质干细胞具有较好的生长活性及增殖潜能,且细胞传代过程中ZUB1抗原稳定表达,并可在体外定向诱导分化为脂肪细胞、成骨细胞、神经元样细胞。本发明提供的是一种较理想的人骨髓间充质干细胞分选纯化的方法,提高了原代间充质干细胞的纯度及分离培养的效率,有助于间充质干细胞生物学特性的研究及在临床检测和应用中的推广。
搜索关键词: zub1 免疫 分选 代人 骨髓 间充质 干细胞 方法
【主权项】:
1.单抗ZUB1免疫磁珠分选原代人骨髓间充质干细胞的方法,其特征是通过以下步骤实现:(1)从骨髓悬液中分离得到单个核细胞,(2)用专利申请号为200510061034.2所公开的单克隆抗体ZUB1为标记,通过间接免疫磁珠分选系统正向分选获得ZUB1抗原阳性的人骨髓间充质干细胞,(3)ZUB1抗原阳性的细胞在体外培养体系中贴壁生长、呈梭形,培养5天左右细胞开始明显扩增,扩增传代后细胞表型检测显示:CD29、CD44、CD166、CD105阳性,CD14、CD34、CD45、HLA-DR表达为阴性,是均一的人骨髓间充质干细胞,并可在体外定向诱导分化为脂肪细胞、成骨细胞、神经元样细胞。
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