[发明专利]ω-芋螺毒素M VII A突变体及制备和应用无效

专利信息
申请号: 200610052400.2 申请日: 2006-07-11
公开(公告)号: CN1876176A 公开(公告)日: 2006-12-13
发明(设计)人: 詹金彪;夏铮;王峰;徐小蓉;黄建松 申请(专利权)人: 浙江大学
主分类号: A61K38/17 分类号: A61K38/17;A61P29/00;C12N15/12;C12N1/21
代理公司: 杭州求是专利事务所有限公司 代理人: 张法高;赵杭丽
地址: 310027浙*** 国省代码: 浙江;33
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摘要: 发明提供一种重组ω-芋螺毒素M VIIA(CTX M VIIA)突变体,具有SEQ ID NO:1的氨基酸序列,采用与谷胱甘肽S-转移酶(GST)融合表达的方法,在已构建的pGEX-2T/CTX M VIIA原核表达质粒基础上,在大肠杆菌中用IPTG诱导表达GST-CTX M VIIA融合蛋白,经GST亲和层析的方法纯化融合蛋白,用凝血酶进行酶切产生CTX MVIIA的突变体,产物经过凝胶柱进行分离纯化;为获得正确的二硫键配对,先用还原剂将突变体的二硫键配打开,再用PBS透析过夜,空气氧化获得目的产物。本发明方法,操作简单、质量稳定、成本较低,可在制备无成瘾型的镇痛药物中应用。
搜索关键词: 毒素 vii 突变体 制备 应用
【主权项】:
1.一种ω-芋螺毒素M VII A突变体,具有SEQ ID NO:1的氨基酸序列:Gly-Ser-Cys-Lys-Gly-Lys-Gly-Ala-Lys-Cys-Ser-Arg-Leu-Met-Tyr-Asp-Cys-Cys-Thr-Gly-Ser-Cys-Arg-Ser-Gly-Lys-Cys 27,该多肽有机化合物分子中Cys3与Cys18、Cys10与Cys22、Cys17与Cys27之间分别形成三对二硫键,C-端为非酰胺化Cys。
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