[发明专利]转基因昆虫荧光基因表达相对量无损伤测定方法

摘要

本发明公开了一种转基因昆虫荧光基因表达相对量无损伤测定方法。是通过荧光体视显微镜观察转基因昆虫个体，用数码相机或数码CCD摄影设备摄取图像，利用图像处理软件，将所得图像进行预处理，再将所摄取的RGB彩色图像转化为相应颜色分量的灰度图像，确定二值化分割图像的阈值和用于消除图像二值化后斑点的中值滤波的邻域大小，用matlab应用数学软件计算所得昆虫形体部分荧光值的平均值，作为转基因昆虫荧光基因表达量的相对数值。它可在不损伤昆虫、不需分子生物学或生化测试的情况下，通过荧光观察和数码照像，可获得转基因昆虫荧光基因表达相对量，达到定量地估量转基因效率、估量外源基因与标志基因结合构成的融合蛋白表达量的目的。

主权项

1.转基因昆虫荧光基因表达相对量无损伤测定方法，其特征在于：1)是利用荧光体视显微镜观察转基因昆虫的个体，用数码相机或数码CCD摄影设备，在暗室中按1/60秒-20秒曝光时间摄取表达荧光的转基因昆虫图像；2)运用图像处理技术，首先将所得昆虫图像进行预处理，明确图像中昆虫部分和黑色背景界限，再将所摄取的表现荧光的转基因昆虫的RGB彩色图像转化为相应颜色分量的灰度图像，按所得灰度图像像素值的分布生成直方图，根据该直方图，按照选择能够清晰分割图像背景和昆虫部分的最小阈值的要求，确定二值化分割图像的阈值，然后利用该阈值进行二值化分割图像，得到一张与原图像素大小一样，但昆虫部分像素值为1、即为白色，背景部分像素值为0、即为黑色的二值图像，最后，利用中值滤波消除图像斑点，确定中值滤波的邻域大小；3)根据所得的阈值和中值滤波的邻域大小，利用matlab应用数学软件，累加灰度图像中分离所得昆虫部分像素值，除以所取的像素点数，所得平均值作为转基因昆虫荧光基因表达量的相对数值。