[发明专利]无伤害提取活体蜜蜂DNA的方法

摘要

本发明公开的无伤害提取活体蜜蜂DNA的方法，是从蜂王、工蜂或雄蜂在刚刚羽化时留在巢房底部的蜕皮组织中提取DNA，操作过程简单，不伤害活体蜜蜂，成本较低。本发明的无伤害提取活体蜜蜂的DNA方法在蜜蜂育种上具有重要的应用价值，通过提取蜜蜂蜕皮的DNA，PCR检测其经济性状基因位点的基因型，预测蜂王或雄蜂的生产性能，可以提高优良蜂王选留和雄蜂配种的准确性，大大提高蜜蜂育种效率。

主权项

1.无伤害提取活体蜜蜂DNA的方法，其特征是步骤如下：1)把培养到蛹期的王台、雄蜂蛹脾或工蜂蛹脾放入35℃、相对湿度65％～75％的培养箱内培养，在蜂王、雄蜂或工蜂刚刚羽化时，抓住蜂王、雄蜂或工蜂，在其胸部背板粘上带编号的标记，从相应的巢房内收集蜕皮放入1.5ml的离心管中并记好编号；2)往收集在离心管中的蜕皮加入200ul_5％Chelex 100、10ul 10mg/ml的蛋白酶K和7ul DTT，振荡混匀，确保蜕皮浸泡在Chelex溶液中，55℃温浴20～24小时，取出振荡混匀，在100℃水浴中变性8分钟，在4℃、12,000～13,000g条件下离心3分钟，得到含有活体蜜蜂DNA的上清液。